[发明专利]一种α-糖苷酶基因突变体及在制备2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸中的应用有效
| 申请号: | 202011392317.6 | 申请日: | 2020-12-02 |
| 公开(公告)号: | CN112695021B | 公开(公告)日: | 2023-02-28 |
| 发明(设计)人: | 李艳;贾红华;齐雪莲;余杰;邵俊澜;严明 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
| 主分类号: | C12N9/24 | 分类号: | C12N9/24;C12N15/56;C12N15/81;C12N1/19;C12P19/60;C12R1/84 |
| 代理公司: | 南京新慧恒诚知识产权代理有限公司 32424 | 代理人: | 王月霞 |
| 地址: | 211816 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 糖苷酶 基因 突变体 制备 葡萄糖 抗坏血酸 中的 应用 | ||
1.一种α-葡萄糖苷酶突变体,其特征在于,所述突变体是在氨基酸序列如SEQ NO.1所示的α-葡萄糖苷酶发生了一个氨基酸位点的突变;所述突变为将第270位酪氨酸突变为苯丙氨酸,简称Y270F。
2.编码权利要求1所述的α-葡萄糖苷酶突变体的基因。
3.一种重组载体,其特征在于,所述重组载体携带权利要求2所述的编码基因。
4.一种重组细胞,其特征在于,所述重组细胞表达权利要求2所述的α-葡萄糖苷酶突变体的编码基因。
5.一种生产α-葡萄糖苷酶突变体的方法,其特征在于,由权利要求4所述重组细胞发酵培养获得。
6.权利要求1所述α-葡萄糖苷酶突变体在制备2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸中的应用。
7.如权利要求6所述α-葡萄糖苷酶突变体在制备2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸中的应用,其特征在于,使用权利要求1所述的α-葡萄糖苷酶突变体以麦芽糖、麦芽低聚糖、异麦芽糖、蔗糖、曲二糖和淀粉为糖基供体、L-抗坏血酸为糖基受体,转化生成2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述糖基受体为30-50g/L L-抗坏血酸,催化剂浓度为10-20 U/mL。
9.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述应用 在30℃-55℃、pH4.0-5.0条件下反应1-6h。
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