[发明专利]一种围产期间充质干细胞种子库的构建方法

说明书

本发明公开了一种围产期间充质干细胞种子库的构建方法，包括产妇筛查、样本采集、样本检测、样本预处理、分离制备、原代培养、传代培养、细胞检测、细胞冻存、建立可供检索的细胞信息档案、编码入库并上传细胞信息档案。本发明属于细胞库构建的技术领域，具体是指一种可以提高干细胞的安全性，简化操作步骤的围产期间充质干细胞种子库的构建方法。

技术领域

本发明属于细胞库构建的技术领域，具体是指一种围产期间充质干细胞种子库的构建方法。

背景技术

干细胞治疗技术是近年来生命科学领域的新兴技术，已经被应用到了多种难治性疾病的治疗研究中，并取得了积极的进展。目前，全球干细胞治疗市场可分为地中海贫血、脑瘫、糖尿病、白血病、自闭症等等。随着糖尿病等许多疾病的发病率逐年攀升，增加了对干细胞的临床需求，从而推动了干细胞治疗市场的发展。根据全球知名调研机构Technavio发布的报告，全球干细胞治疗市场有望在2020年至2024年间增长5.8亿美元左右，预计将以7％的复合年增长率增长。由此可见，临床需求的增加给干细胞的市场发展带来了更大的空间。

间充质干细胞(mesenchymal stem cell，MSC)为干细胞家族重要成员之一，起源于早期发育的中、外胚层，是一种具有自我更新能力和多向分化潜能的成体干细胞，它来源广泛、取材方便、可以大规模扩增，同时具有造血支持及免疫调节功能，使其成为最有前途的临床使用种子细胞。

随着近年来间充质干细胞全领域的快速发展，建立并优化间充质干细胞建库方法，对于开展干细胞研究、推动其临床应用都具有重要意义。

发明内容

为了解决上述难题，本发明提供了一种可以提高干细胞的安全性，简化操作步骤的围产期间充质干细胞种子库的构建方法。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：一种围产期间充质干细胞种子库的构建方法，包括如下步骤：

1)产妇筛查；

2)样本采集；

3)样本检测；

4)样本预处理；

5)细胞分离制备；

6)原代培养；

7)传代培养；

8)细胞检测；

9)细胞冻存；

10)建立可供检索的细胞信息档案；

11)编码入库并上传细胞信息档案。

进一步地，所述步骤1)中产妇筛查是指在充分了解产妇及其丈夫家族病史及旅居史的情况符合供者条件后，取5ml产妇外周血及5ml脐血进行病原微生物检测，包括但不限于乙肝、丙肝、梅毒、艾滋等传染病检测。

进一步地，所述步骤2)中样本采集为将正常足月分娩健康新生儿胎盘、脐带进行无菌采集；包括如下步骤：

1)在距脐带两端2-3cm处结扎；

2)剪下结扎好的脐带置于装有30-50ml储存液的采集瓶中；

3)将去掉脐带后的胎盘置于装有400-600ml储存液的采集盒中。

进一步地，所述储存液为含40UI/ml庆大霉素的生理盐水。

进一步地，所述步骤3)中样本检测为对胎盘、脐带进行无菌检测，包括但不限于支原体、真菌、细菌、微生物等，具体的为取储存液及清洗液(即步骤4中最后一步清洗用生理盐水)进行检测。

进一步地，所述步骤4)中样本预处理包括如下步骤：

1)将样本在生理盐水中洗净残血；