[发明专利]一种大米抗氧化活性肽的制备方法

权利要求书

1.一种大米抗氧化活性肽的制备方法，所述大米抗氧化活性肽为KHNRGDEF，其特征在于，包括如下步骤：

S1、提供米糠谷蛋白酶解液；

S2、对所述米糠谷蛋白酶解液依次进行微滤处理、超滤处理，获得多肽溶液；

其中，所述多肽溶液中的多肽的分子量为1000-1100Da；

S3、以S2获得的多肽溶液为电解液，以活性炭或外表包裹有活性炭层的导电材料作为电极，将电解液的pH值调节至7.86-7.90，然后在2个电极之间通直流电，使得等电点不在7.88的多肽被电极吸附，获得高纯多肽溶液；

S4、采用改性PC膜作为超滤膜，将S3获得的高纯多肽溶液用NaHCO₃调节pH为10后，超滤1h，解吸附4h，将超滤机中的溶液收集后，喷雾干燥，获得大米抗氧化活性肽粉末；

其中，所述改性PC膜的制备方法为：将PC膜置于丙酮中溶胀3-8s后，置于浸涂液中浸涂2-3h，再取出晾干后，置于蒸馏水中浸泡45-90min，然后取出干燥，即得；

所述浸涂液为Zn(NO₃)₂、NH₃·H₂O和水的混合溶液，Zn(NO₃)₂的浓度为0.4-0.8wt%，浸涂液的pH值为9-11；

改性前的PC膜的孔径为0.04-0.06μm，质地平滑，可耐高温，厚度为9-11μm，计算孔径密度：3×10⁸-5×10⁸ pore/cm²；

所述米糠谷蛋白酶解液的制备方法包括如下步骤：

（1）提供脱脂米糠，对所述脱脂米糠依次进行清洗、干燥、粉碎和过筛处理，获得脱脂米糠粉末；

（2）将步骤（1）获得的脱脂米糠粉末与水按1:8-12的质量比混合均匀，调节pH值至8.5-9.0，再加热至35-45℃并搅拌2-3h，然后以7000-8000r/min的转速离心15-30min，获得上清液；

（3）将步骤（2）获得的上清液的pH值调节至4-4.5，静置30-60min后，以6000-8000r/min的转速离心分离，获得米糠谷蛋白固相物；

（4）将步骤（3）获得的米糠谷蛋白固相物复溶于水中，调节pH值至7，再搅拌2-3h，获得米糠谷蛋白溶液；

（5）将步骤（4）中米糠谷蛋白溶液的米糠谷蛋白浓度调节至6-8wt%，保持在37℃条件下静置20-40min后，调节pH值至8.5-10.0，获得碱性米糠谷蛋白溶液；

（6）对步骤（5）获得的碱性米糠谷蛋白溶液依次进行酶解和离心处理，获得米糠谷蛋白酶解液；

其中，按[E]/[S]比1.5-1.8%向碱性米糠谷蛋白溶液中添加中性蛋白酶，在45-55℃条件下水解4-5h后，以6000-7000r/min的转速离心10-20min，获得米糠谷蛋白酶解液。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，所述脱脂米糠的含油率低于6wt%。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）和步骤（5）中，采用碳酸氢钠调节pH值。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，S3中，使用Na₂HPO₄•2H₂O调节电解液的pH值。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，S3中，在2个电极之间通100-120V的直流电。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，S3中，通电时间为20-40min。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，S3中，所述活性炭为生物活性炭。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，S4中，所述浸涂液的pH值为10。

9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，S4中，喷雾干燥的工艺条件为：进风温度为180-200℃，出风温度为70-90℃，料液流速为20-25r/min。