[发明专利]HDAC5作为孕期感染子代大鼠模型外周标志物的方法有效

专利信息
申请号: 202011366492.8 申请日: 2020-11-30
公开(公告)号: CN112400799B 公开(公告)日: 2022-01-11
发明(设计)人: 李文强;苏玺;杨勇锋;宋盟;邵明龙;陈腾飞;吕路线 申请(专利权)人: 河南省精神病医院(新乡医学院第二附属医院)
主分类号: A01K67/02 分类号: A01K67/02;C12Q1/6883
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 453000 河南*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: hdac5 作为 孕期 感染 子代 大鼠 模型 标志 方法
【权利要求书】:

1.HDAC5作为孕期感染子代大鼠模型外周标志物的方法,其特征在于,包括以下步骤:

步骤1:孕鼠准备:选择SPF级10-14周龄的SD种鼠,新环境适应2周后开始育种,每3-5只雄鼠与1只雌鼠置于一个分段笼里,前三天只允许嗅觉接触无身体接触,3天后放一起交配,次日早上通过阴道栓检查雌鼠是否成功受孕,成功受孕者入组;

步骤2:孕期感染:确定怀孕后第9天尾静脉注射10mg/kg的聚肌胞苷酸(PolyI:C)作为模型组或等体积生理盐水作为对照组,模型组和对照组各随机选取3只,在注射3小时后处死,检测孕鼠外周血血清IL-1β、IL-6、TNF-α的蛋白水平,通过免疫激活状态确定注射效果,其余孕鼠继续饲养至产下子鼠;

步骤3:行为学检测:将12-15只仔鼠于40天、56天采用小动物行为采集和分析系统进行Y迷宫、前脉冲抑制实验,分别分析大鼠的学习记忆状态、感觉门控作用,比较两组动物随年龄增长在行为上的差异;

步骤4:对孕期感染子代大鼠模型进行脑组织转录组测序及荧光定量PCR分析;

步骤5:对孕期感染子代大鼠模型外周血单核细胞中HDAC5水平进行验证。

2.根据权利要求1所述的HDAC5作为孕期感染子代大鼠模型外周标志物的方法,其特征在于:步骤2中ELISA检测孕鼠血浆IL-6、IL-1β和TNF-α的表达水平,当结果显示模型组孕鼠血浆炎症因子水平相比于对照组显著升高,则提示孕期免疫激活。

3.根据权利要求1所述的HDAC5作为孕期感染子代大鼠模型外周标志物的方法,其特征在于:步骤3中行为学检测时间控制在8:00-18:00之间,房间内控制适宜的温度、湿度及照明。

4.根据权利要求1所述的HDAC5作为孕期感染子代大鼠模型外周标志物的方法,其特征在于:步骤4中将孕期感染子代大鼠模型40天子代前额叶皮质进行转录组测序分析HDAC5转录水平,并将测序结果通过荧光定量PCR进一步验证。

5.根据权利要求1所述的HDAC5作为孕期感染子代大鼠模型外周标志物的方法,其特征在于:收集孕期感染大鼠模型外周血样,分离单核淋巴细胞,提取RNA,定量分析HDCA5表达水平。

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