[发明专利]一种稳定检测抗CD22单抗生物学活性的方法在审
| 申请号： | 202011365050.1 | 申请日： | 2020-11-27 |
| 公开（公告）号： | CN112626162A | 公开（公告）日： | 2021-04-09 |
| 发明（设计）人： | 王兰;郭莎;于传飞;张峰;王文波;段茂芹;郭潇;刘春雨 | 申请（专利权）人： | 中国食品药品检定研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/02 | 分类号： | C12Q1/02;G01N33/68 |
| 代理公司： | 北京预立生科知识产权代理有限公司 11736 | 代理人： | 孟祥斌;李红伟 |
| 地址： | 100050*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 稳定 检测 cd22 抗生 活性 方法 | ||
1.一种稳定、高效地检测抗CD22单抗生物学活性的方法，所述方法包括：
(1)将proteinA加入到96孔微孔板，静置包被；
(2)将抗CD22抗体梯度稀释后加入到(1)中的96孔微孔板，静置包被；
(3)向B细胞悬液中加入抗IgM抗体，然后加入到(2)中的96孔微孔板进行孵育；
(4)向(3)中96孔微孔板内加入检测试剂，用酶标仪检测活细胞水平。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，proteinA的预包被浓度为0.1-10μg/ml，优选的，浓度为1μg/ml，优选的，(1)中静置方式为室温静置或2～8℃静置，优选的，静置方式为室温静置，更优选的，室温静置时间为1h。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，抗CD22抗体的稀释比例为1:1.5-1:4，优选的，稀释比例为1:2。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，抗CD22抗体包被时间为30-60min，优选的，包被时间为30min。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述B细胞包括：Ramos、GA-10细胞、Raji细胞、Daudi细胞、BJAB细胞。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，(3)中加入到96孔微孔板的B细胞的密度为4×103/孔-1×105/孔，优选的，细胞的密度为4×104/孔。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，加入抗IgM抗体终浓度为0.4～10μg/ml，优选的，终浓度为1μg/ml。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，(3)中细胞孵育的时间为16-96h，优选的，孵育时间为48h。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，(4)中的检测试剂为CellTiterblue、MTS或CellTiter Glo，优选的，检测试剂为CellTiter Glo。
10.权利要求1-9所述的方法在抗CD22抗体药物的质量控制中的应用。
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