[发明专利]一种高温中性蛋白酶的生产工艺在审
| 申请号: | 202011355839.9 | 申请日: | 2020-11-27 |
| 公开(公告)号: | CN112458071A | 公开(公告)日: | 2021-03-09 |
| 发明(设计)人: | 王雪克;王安 | 申请(专利权)人: | 王雪克 |
| 主分类号: | C12N9/54 | 分类号: | C12N9/54;C11D3/386;C11D3/28;C11D3/48;C11D3/14;C12R1/07 |
| 代理公司: | 广州高炬知识产权代理有限公司 44376 | 代理人: | 洪美 |
| 地址: | 210000 江苏省南京市秦淮*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 高温 中性 蛋白酶 生产工艺 | ||
1.一种高温中性蛋白酶的生产工艺,其特征在于:所述高温中性蛋白酶采用微生物发酵的方式制备得到;所述制备过程中采用的生产菌株为耐热芽孢杆菌XJT9503,菌种保藏编号为;
所述蛋白酶成品包括以下重量份的组分:羧甲基纤维素钠8-10份、4A沸石5-6份;
所述制备方法包括以下步骤:
S1:对原始菌种进行扩增培养,得到单位体积内菌种数量符合要求的体积较多的种子液,之后,将得到的种子液接种至发酵罐中,进行发酵,发酵培养时间为70-75h;
S2:在S1步骤的基础上,将发酵得到的发酵液进行多次过滤,得到过滤液,对过滤液进行减压浓缩后,得到蛋白酶溶液;
S3:向S2步骤中得到的蛋白酶溶液中依次添加羧甲基纤维素钠以及4A沸石,之后充分搅拌,得到固体混合物料;
S4:将S3步骤中得到的固体混合物料使用造粒机进行造粒,得到成品的蛋白酶。
2.根据权利要求1所述一种高温中性蛋白酶的生产工艺,其特征在于:所述S2步骤中对过滤液进行减压浓缩前,向对过滤液进行灭菌;所述过滤液进行灭菌时,先将过滤液在85℃下处理15s,之后,将过滤液的温度控制在40℃,维持2h,最后,将过滤液在135℃下处理4s;所述灭菌处理完成后,对过滤液进行减压浓缩,浓缩温度低于30℃。
3.根据权利要求1所述一种高温中性蛋白酶的生产工艺,其特征在于:所述S3步骤中,先将需要添加的4A沸石中的1/3投入到蛋白酶溶液中,之后,使用超声波粉碎机对溶液进行震荡、粉碎,粉碎时间为10-15min;所述超声粉碎时间进行到2/3后,将1/3的羧甲基纤维素钠投入到蛋白酶溶液中;所述超声波粉碎完成后,将蛋白酶溶液投入到搅拌釜中,在搅拌状态下,将剩余2/3的4A沸石和2/3的羧甲基纤维素钠投入到反应釜中,完成搅拌。
4.根据权利要求1所述一种高温中性蛋白酶的生产工艺,其特征在于:所述经过造粒机造粒后的成品蛋白酶颗粒呈圆柱形,且圆柱的直径与长度相等;所述成品蛋白酶颗粒上沿长度方向的侧面上均匀开设有凹槽。
5.根据权利要求1所述一种高温中性蛋白酶的生产工艺,其特征在于:所述蛋白酶成品包括以下重量份的组分:崩解剂6-8份、保护剂3-5份;所述崩解剂为枸橼酸和碳酸氢钠的混合物,两者的混合比例为1-1.5:1;所述保护剂为海藻糖、甘露醇以及甘油的混合物,且两者的比例为0.5:2:3;所述S2步骤中得到蛋白酶溶液后,将保护剂添加到溶液中;所述保护剂在S2步骤中的添加量为其重量的1/2;所述造粒机生成蛋白酶颗粒后,将剩余的1/2保护剂中的1/2喷洒到蛋白酶颗粒表面,之后,将蛋白酶颗粒投入到盛装崩解剂的容器中,进行充分的搅拌,直到蛋白酶颗粒表面干燥。
6.根据权利要求5所述一种高温中性蛋白酶的生产工艺,其特征在于:所述蛋白酶颗粒中包括以重量份计的3-5份的抗菌剂;所述抗菌剂为鼠尾草精油、夹竹桃提取物、乙螨唑的混合物,三者的混合比例为3-5:4-8:5-6;所述抗菌剂混入到剩余的1/4的保护剂中;所述蛋白酶颗粒表面附着崩解剂并干燥后,再次使用混有抗菌剂的1/4保护剂进行喷洒;所述1/4保护剂的喷洒过程分的多次进行,每次喷洒后,等待蛋白酶颗粒干燥后,再次进行喷洒,且每次喷洒后蛋白酶颗粒表面潮湿,无明显液体流动现象。
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