[发明专利]一种基于多孔纳米级温敏软胶体的细胞大规模培养的方法在审
申请号: | 202011345871.9 | 申请日: | 2020-11-25 |
公开(公告)号: | CN112442484A | 公开(公告)日: | 2021-03-05 |
发明(设计)人: | 刘汉石;崔小林 | 申请(专利权)人: | 大连普瑞康生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09;C12N5/0775;C12M3/06;C12M3/00;C12M1/34;C12M1/16;C12M1/04;C12M1/02;C12M1/00 |
代理公司: | 大连东方专利代理有限责任公司 21212 | 代理人: | 周莹;李馨 |
地址: | 116000 辽宁省*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 多孔 纳米 级温敏软 胶体 细胞 大规模 培养 方法 | ||
1.一种基于多孔纳米级软胶体的细胞培养方法,其特征在于,所述方法以多孔纳米级软胶体与细胞或组织培养物混合,液态输送至中空柱反应器中,在32-37℃条件下固化进行培养。
2.根据权利要求1所述的一种基于多孔纳米级软胶体的细胞培养方法,其特征在于,所述方法以细胞培养系统进行培养,所述系统包括:细胞培养维持单元,中空柱反应器,接种及收获单元;细胞培养维持单元为中空柱反应器内的细胞或组织培养物提供营养物质并维持中空柱反应器内温度。
3.根据权利要求2所述的一种基于多孔纳米级软胶体的细胞培养方法,其特征在于,所述细胞培养维持单元包括培养基容器(4),罐外控温夹套(5),透析装置(6),检测电极(7)以及气体质量控制模块;气体的质量流量与溶液中溶氧和pH值关联控制;所述接种及收获单元包括带有温控装置的罐体(10),罐体内设有检测电极(7)、培养基透析装置(6)、气体传输系统(11);所述中空反应器包括中空柱,中空反应器上下两端分别设有细胞入口(12)和细胞出口(13),中空反应器侧面设有培养基入口(14)和培养基出口(15)。
4.根据权利要求3所述的一种基于多孔纳米级软胶体的细胞培养方法,其特征在于,所述透析装置为半透膜透析袋;所述检测电极包括温度电极,溶液中溶氧电极,pH电极,活细胞电极;所述气体质量控制模块包括气体质量流量计(8)和空气分布器(9)。
5.根据权利要求2所述的一种基于多孔纳米级软胶体的细胞培养方法,其特征在于,所述中空柱反应器的中空柱表面为致密多孔结构,孔道表面经亲疏水处理或正负电荷处理;所述致密多孔结构为辐照刻蚀多孔,纤维状多孔,烧结多孔或激光加工、机械加工、注塑的多孔;所述多孔的孔径为0.2-100um,所述中空柱的直径为2-50mm,长度为10-1000mm,个数随着反应器体积的增加持续增加;中空柱平行阵列,形成圆形、长方形或六边形以便于封装;所述中空柱外壁与反应器内壁密闭空腔,中空柱内壁与反应器的细胞入口形成密闭空腔,两个空间彼此独立。
6.根据权利要求2所述的一种基于多孔纳米级软胶体的细胞培养方法,其特征在于,所述中空柱反应器的中空柱多个单体串联或并联以增加中空柱反应器的体积。
7.根据权利要求2所述的一种基于多孔纳米级软胶体的细胞培养方法,其特征在于,所述中空柱的材质为PVDF、PMMA、PC、PE、PTFE、PP、尼龙、PES、PET或烧结多孔材料。
8.根据权利要求2所述的一种基于多孔纳米级软胶体的细胞培养方法,其特征在于,所述中空柱反应器液体培养体积为10ml~10L,培养密度为1×107-10×107cells/ml,其中,细胞、类器官组织或肿瘤组织与软胶体的体积比达到0.6-0.85。
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