[发明专利]一种细胞色素P450环氧酶及其应用有效
申请号: | 202011329678.6 | 申请日: | 2020-11-24 |
公开(公告)号: | CN112410385B | 公开(公告)日: | 2022-07-22 |
发明(设计)人: | 刘立明;燕宇;宋伟;陈修来;刘佳;高聪 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02;C12P17/02;C12N15/70;C12R1/19 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 林娟 |
地址: | 214000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 细胞 色素 p450 环氧酶 及其 应用 | ||
1.一种合成环氧降冰片烷的方法,其特征在于,利用表达来源于Pseudomonas putida的环氧酶的菌株以降冰片烯为底物,生产环氧降冰片烷;所述环氧酶的氨基酸序列如SEQID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述菌株以Escherichia coli BL21为出发菌株。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,以pET28a为表达载体在Escherichia coliBL21中表达所述环氧酶。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,反应体系中含有有机相和水相,所述有机相和水相的体积比为2-6:1。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,反应pH为8.0-8.5。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,反应温度为30-37 ℃。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,将菌株经过12-13h或16-17h的诱导,诱导后收集细胞,将细胞加入反应体系中反应。
8.氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的环氧酶在以降冰片烯为底物制备环氧降冰片烷中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,以所述环氧酶,或以表达所述环氧酶的基因工程菌为催化剂,催化降冰片烯生成环氧降冰片烷。
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