[发明专利]一种新型冠状病毒基因组RNA的提取与试剂匹配方法

权利要求书

1.一种新型冠状病毒基因组RNA的提取方法，其特征在于：具体包括如下步骤：

步骤1：相关基本操作：对相关参与工作的设备进行功能检测，然后通电进入待机状态，对参与操作的相关试剂和原材料进行判断，保留完全合格的操作原料；

步骤2：收集相关病毒溶液：将含有病毒的原液置于36-38摄氏度培养箱中培养，然后将培养液倒入液体培养基，摇晃培养10-12小时后备用；

步骤3：初步离心操作：取1毫升样本离心，采用12000转/每分钟，离心操作5分钟，抛弃上清液；

步骤4：二次离心操作：加入1毫升裂解缓冲液，采用12000转/每分钟，离心操作8分钟，再次离心，抛弃上清液，加入裂解液进行溶解沉淀，70摄氏度时放置5分钟，冷却至55摄氏度时加入足量蛋白酶K，对溶液保温1小时，然后升高温度至90摄氏度，对蛋白酶K进行杀灭；

步骤5：基本溶解操作：加入足量的异丙醇，反复混合后，将温度降低至65摄氏度时，静止15分钟，然后补充适量裂解缓冲液，然后冰溶3分钟；

步骤6：相关干燥操作：对上述溶液进行12000转/每分钟，离心操作5分钟，抛弃上清液，加入5毫升乙醇，上下颠倒5次，充分混合后，再进行离心操作3分钟，抛弃上清液后，将沉淀吹干；

步骤7：产品获取和保存：然后加入50微升纯水，溶液加热至65摄氏度即可使用，当长期不用时，应当置于-20摄氏度时冷冻保存。

2.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒基因组RNA的提取方法，其特征在于：所述步骤2中，培养箱应当放置在无菌环境中操作。

3.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒基因组RNA的提取方法，其特征在于：所述步骤4中，裂解缓冲液由蔗糖溶液、Tris-HCl溶液、MgCl₂溶液和Triton-X-100组成。

4.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒基因组RNA的提取方法，其特征在于：所述步骤4中，蛋白酶K由双蒸水配置。

5.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒基因组RNA的提取方法，其特征在于：所述步骤6中，吹干沉淀时首先开启大风量快吹，然后小风量转动吹干。

6.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒基因组RNA的提取方法，其特征在于：所述步骤6中，吹干沉淀时需要在通风环境操作。

7.一种新型冠状病毒基因组RNA的试剂匹配方法，其特征在于：具体包括如下步骤：

步骤1：试剂的基本选择：选取能够溶解冠状病毒基因组RNA的试剂，将试剂全面排序，并且对试剂的适用环境进行标注；

步骤2：试剂的全面检测：抽取适量的试剂，然后抽取对应体积的病毒RNA溶液，将其混合后观察反应速度，然后对速度值进行记录；

步骤3：重复检测：更换反应顺序，对试剂的反应速度进行二次记录；

步骤4：合理选择：将反应效果最佳的试剂以及试剂组合抽取后单独标记，以备后续使用。

8.根据权利要求7所述的一种新型冠状病毒基因组RNA的试剂匹配方法，其特征在于：所述步骤1中，全部操作必须在无菌环境中操作。