[发明专利]一种包载磁性外泌体的难愈性创面敷料的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种包载磁性外泌体的难愈性创面敷料，其特征在于，所述敷料包括磁性外泌体、温敏水凝胶。

2.一种权利要求1所述的敷料的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

(1)将壳聚糖溶液与β-甘油磷酸钠溶液混合，得到混合溶液I；

(2)向混合溶液I中加入羟乙基纤维素溶液，得到混合溶液II；

(3)将磁性外泌体加入混合溶液II中搅拌混匀，静置得到包载磁性外泌体的难愈性创面敷料；

优选地，步骤(1)-(3)中所述溶液混合的条件为冰浴；

优选地，所述包载磁性外泌体的难愈性创面敷料在人体生理温度下胶凝；

优选地，所述壳聚糖溶液：β-甘油磷酸钠溶液：羟乙基纤维素溶液的体积比为(4～9):1:2。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述壳聚糖溶液由壳聚糖溶解于酸性溶剂中得到的；

优选地，所述酸性溶剂为0.1M醋酸溶液；

优选地，所述壳聚糖溶液的浓度为1-5％(w/v)；

更优选地，所述壳聚糖溶液的浓度为1.5-2.5％(w/v)。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述β-甘油磷酸钠溶液由β-甘油磷酸钠溶解于去离子水中得到的；

优选地，所述β-甘油磷酸钠包括无水β-甘油磷酸钠、β-甘油磷酸钠五水化合物；

优选地，所述β-甘油磷酸钠溶液的浓度为0.1-2g/mL；

更优选地，所述β-甘油磷酸钠溶液的浓度为0.5-1.0g/mL。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述羟乙基纤维素溶液由羟乙基纤维素溶于去离子水中得到的；

优选地，所述羟乙基纤维素溶液在25℃条件下的平均粘度为100-1000mpa.s；

优选地，所述羟乙基纤维素溶液的浓度为1-100mg/mL；

更优选地，所述羟乙基纤维素溶液的浓度为10-50mg/mL。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述混合溶液II与磁性外泌体按照体积质量比为100μL:(1～10)μg的比例混合。

7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述磁性外泌体是通过Fe₃O₄超顺磁性纳米粒刺激干细胞分泌得到的外泌体。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述磁性外泌体的提取过程包括如下步骤：

(1)对数生长期的干细胞中加入Fe₃O₄超顺磁性纳米粒溶液；

(2)共孵育一段时间后，分离细胞上清并提取磁性外泌体；

优选地，步骤(1)中所述干细胞为人骨髓间充质干细胞；

优选地，步骤(1)中所述Fe₃O₄超顺磁性纳米粒溶液的浓度为0.5-2mg/mL；

优选地，步骤(2)中所述共孵育的时间为72-120h。

9.权利要求1所述的敷料在促进新生血管生成中的应用。

10.权利要求1所述的敷料在制备难愈性皮肤创伤修复药物中的应用。