[发明专利]一种抑制地中海富盐菌中目的基因表达的方法在审
| 申请号： | 202011277932.2 | 申请日： | 2020-11-16 |
| 公开（公告）号： | CN114507684A | 公开（公告）日： | 2022-05-17 |
| 发明（设计）人： | 向华;韩静;林琳 | 申请（专利权）人： | 中国科学院微生物研究所 |
| 主分类号： | C12N15/74 | 分类号： | C12N15/74;C12N1/21;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 魏少伟 |
| 地址： | 100101 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 抑制 地中海 富盐菌中 目的 基因 表达 方法 | ||
1.一种抑制地中海富盐菌中目的基因表达的方法，包括：
1)敲除出发地中海富盐菌中cas3基因，得到cas3敲除菌；
2)向所述cas3敲除菌中导入转录抑制目的基因表达的crRNA的表达盒，得到重组地中海富盐菌，与所述出发地中海富盐菌相比，所述重组地中海富盐菌中所述目的基因表达降低。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述crRNA靶向所述目的基因的编码区或启动子区。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述表达盒由启动子、repeat序列、spacer序列和终止子序列连接得到；所述repeat序列为序列表中SEQ ID No.4中的第55-84位，所述spacer序列靶向所述目的基因的编码区或启动子区。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述表达盒通过含有所述表达盒的重组载体导入所述出发地中海富盐菌中。
5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于：所述目的基因为crtI基因，所述表达盒的序列为序列表中SEQ ID No.4、SEQ ID No.5、SEQ ID No.6或SEQ ID No.7。
6.权利要求1中所述cas3敲除菌。
7.权利要求1-5中任一所述重组地中海富盐菌。
8.成套试剂，由权利要求1-5中任一所述cas3敲除菌与所述表达盒组成，或由权利要求1-5中任一所述cas3敲除菌与所述重组载体组成。
9.权利要求1-5中任一所述表达盒或所述重组载体。
10.权利要求8所述成套试剂或权利要求9所述表达盒或所述重组载体在制备抑制目的基因表达重组地中海富盐菌中的应用。
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