[发明专利]一种检测食品及其生产、流通过程中抗生素残留的方法以及试剂盒

权利要求书

1.一种检测食品及其生产、流通过程中抗生素残留的方法，其特征在于，包括以下：

步骤a，样品前处理：

液体样品前处理：随机抽取待检测液体样品，取一定量的所述液体样品进行过滤并除菌，得到第一待测样液；

固体样品前处理：随机抽取待检测固体样品，取一定量的所述固体样品进行均质化处理，进行离心、过滤并除菌，得到第二待测样液；

步骤b，目标菌液制备：

根据所要求检测的抗生素种类，选择葡萄球菌作为目标菌并制备相应的目标菌液，所述目标菌液的初始活菌浓度为100-10000cfu/ml；

步骤c，试剂盒培养：

取相同体积的灭菌水和第一待测样液或所述第二待测样液分别加入试剂盒中，振荡混匀，得到空白对照试剂盒和加样试剂盒，向所述加样试剂盒与所述空白对照试剂盒中分别加入相同且等量的所述目标菌液，在相同的培养条件下，培养30min后，分别测定所述加样试剂盒中葡萄球菌的活菌浓度，分别测定所述空白对照试剂盒中葡萄球菌的活菌浓度，得到葡萄球菌的样品活菌浓度与空白对照活菌浓度，根据以下公式计算得到葡萄球菌的第一次活菌生长率，所述公式为：

所述试剂盒为无菌试剂盒，按照重量份数计由以下组分组成：泥鳅提取物40份、河蚌提取物40份、火龙果提取物0.5份和花椰菜提取物0.5份，各组分均为粉末状；

步骤d，判定标准：

以含0.01μg/kg红霉素的样品作为加标样品，以葡萄球菌为目标菌按照所述步骤a~c在相同培养条件下，进行培养，以培养240min时的活菌生长率作为标准生长率，计算得到所述标准生长率为92%，并以所述标准生长率作为判定标准；

步骤e，第一次判定：

当葡萄球菌的第一次活菌生长率之一小于等于所述标准生长率92%时，即可判定为阳性，即所对应的待测样品中有抗生素残留，当葡萄球菌的第一次活菌生长率均大于所述标准生长率时，则需要进行第二次判定；

步骤f，第二次判定：

第一次活菌生长率均大于所述标准生长率的加样试剂盒和空白试剂盒，在所述培养条件下继续培养到240min，分别测定所述加样试剂盒中葡萄球菌的活菌浓度，分别测定所述空白对照试剂盒中葡萄球菌的活菌浓度，并根据所述步骤c中的公式计算得到葡萄球菌的第二次活菌生长率，当葡萄球菌的第二次活菌生长率之一小于等于所述标准生长率时，即可判定为阳性，即所对应的待测样品中有抗生素残留，当葡萄球菌的第二次活菌生长率均大于所述标准生长率时，则可判定阴性，即所对应的待测样品中未检出抗生素残留；

所述待测样品第一次判定为阳性后，进行验证判定：在所述培养条件下继续培养，依次在培养60min、90 min、120 min、150 min、180 min时，选择葡萄球菌作为验证菌，分别测定所述加样试剂盒和所述空白对照试剂盒中葡萄球菌的活菌浓度，并根据所述步骤c中的公式计算得到加样试剂盒中葡萄球菌在各相应培养时间的活菌生长率，葡萄球菌的活菌生长率随培养时间延长而依次连续降低，则可判定为阳性，即所对应的待测样品中有抗生素残留。

2.根据权利要求1所述的一种检测食品及其生产、流通过程中抗生素残留的方法，其特征在于，所述待测样品第二次判定为阳性后，进行验证判定：重复所述步骤a~c，依次在培养30min、60min、90 min、120 min、150 min、180 min时，选择葡萄球菌作为验证菌，分别测定所述加样试剂盒和所述空白对照试剂盒中葡萄球菌的活菌浓度，并根据所述步骤c中的公式计算得到加样试剂盒中葡萄球菌在各相应培养时间的活菌生长率，葡萄球菌的活菌生长率随培养时间延长而依次连续降低，则可判定为阳性，即所对应的待测样品中有抗生素残留。

3.一种组合物在制备检测食品及其生产、流通过程中抗生素残留的试剂盒的用途，其中所述组合物按照重量份数计包括以下组分：泥鳅提取物40~60、河蚌提取物40~60、火龙果提取物0.5~3和花椰菜提取物0.5~3；

所述试剂盒为无菌试剂盒。

4.根据权利要求3所述的用途，所述泥鳅提取物、河蚌提取物、火龙果提取物和花椰菜提取物均为粉末状。