[发明专利]一种双靶向磁性荧光纳米微球、其制备方法及在肝癌循环肿瘤细胞中的应用

权利要求书

1.一种双靶向磁性荧光纳米微球MB-MLP-EpCAM,其特征在于：所述纳米微球是以羧基修饰的四氧化三铁微球为内核，在EDC/DMAP催化下“一锅法”同时修饰上MLP-PEG和TZ-PEG，形成MB-PEG纳米微球；然后，TCO-PEG4-NHS-EpCAM(TCO-PEG4-EpCAM)通过Diels-Alder反应修饰到MB-PEG上；反应结束后，合成了粒径为50.4～60.2nm,电位为-31.0～-31.4mV的目标纳米微球MB-MLP-EpCAM。

2.如权利要求1所述的双靶向磁性荧光纳米微球MB-MLP-EpCAM的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：首先，以羧基修饰的四氧化三铁微球为底物，一锅法合成MB-PEG：即通过在EDC/DMAP的催化下，将MLP-PEG与可点击的PEG四嗪(TZ-PEG)共组装到MB-COOH上，形成MB-PEG纳米微球,其中修饰上的MLP-PEG和TZ-PEG的比率为(1-3)：(2-4)；然后，通过四嗪和亲二烯基之间的Diels-Alder-click反应，将TCO-PEG4-NHS-EpCAM(TCO-PEG4-EpCAM)偶联到MB-PEG纳米微球上。

3.根据权利要求2所述的双靶向磁性荧光纳米微球MB-MLP-EpCAM的制备方法，其特征在于：所述的可点击的PEG四嗪为5-(4-1,2,4,5-四嗪)苄基氨基-5-氧戊二酸。

4.根据权利要求2所述的双靶向磁性荧光纳米微球MB-MLP-EpCAM的制备方法，其特征在于：所述的MLP-PEG为引入L-丙氨酸的二氰基类荧光团PEG。

5.根据权利要求2所述的双靶向磁性荧光纳米微球MB-MLP-EpCAM的制备方法，其特征在于：所述MB-PEG纳米微球修饰上的MLP-PEG和TZ-PEG的比率为(1-2)：(3-4)。

6.如权利要求1所述的双靶向磁性荧光纳米微球MB-MLP-EpCAM制备在肝癌循环肿瘤细胞检测中，对体内循环肿瘤细胞的实时识别成像剂中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述应用是在肝癌循环肿瘤细胞检测方法、检测设备以及检测试剂盒方面的应用。