[发明专利]一种体外培养毛囊的方法

说明书

本发明公开了一种体外培养毛囊的方法，包括1）预先提供模拟毛囊细胞体内生长所需的微环境培养结构，2）预备好可促进毛囊生长的培养液，3）人工取出毛囊并放入微环境培养结构内，再加入培养液，4）对步骤3的微培养结构施加外力手段来调节毛干生长，5）对步骤4内的毛囊加入刺激电流促进毛囊生长；通过预先制得培养结构并取下毛囊放入培养液，辅以施加外力及刺激电流，促进毛囊生长，存活率高、生长快培养周期短，有效满足植发需求。

技术领域

本发明属于植发领域，特别涉及一种通过体外培养的方法来促进毛囊生长。

背景技术

当今社会飞速发展，在发展的同时也为许多社会人带来不可避免的压力，我国患有脱发症状的患者人数也在逐渐上升，传统的毛囊移植植发是将后枕部存活的毛囊组织通过手术取出，直接移植到脱发部位，其主要缺点在于只能将现有的毛囊进行转移，且在取毛囊手术中会对患者后枕部带来一些不可避免的损伤。

如果能够只需取出患者极少数的毛囊组织，并将现有的毛囊组织体外培养，培养成功后，再对患者移植培养的毛囊，就会大大减少移植手术的复杂程度和工作量，同时也减轻了对患者身体健康的损伤，而组织工程学的发展使再生医学获得了更多的可能性，并将这种构想成为了可能，人类皮肤构建物（HSC）让大量的脱发症患者看到了治愈脱发疾病的美好愿景，也为治疗患有严重皮肤疾病患者提供了可实行的思考方向，如今，该领域存在几个比较大的难题：（1）如何将毛囊重新整合到人类皮肤构建物，并能够提供使其能够较好保存培养的外部微环境；（2）DPC细胞是毛囊重新构造的重要种子细胞，但是它的保存和持续增殖也是亟需解决的问题；（3）如何控制毛囊生长的方向和毛干的粗细程度；为了解决这些问题，我们设计了该项发明。

发明内容

本发明提供一种体外培养毛囊的方法，包括1）预先提供模拟毛囊细胞体内生长所需的微环境培养结构，2）预备好可促进毛囊生长的培养液，3）人工取出毛囊并放入微环境培养结构内，再加入培养液，4）对步骤3的微培养结构施加外力手段来调节毛干生长，5）对步骤4内的毛囊加入刺激电流促进毛囊生长。

作为对本发明的改进，所述微环境培养结构是上半部分为培养基微孔、下半部分为培养基凹槽的模具，所述模具包括上半模具和下半模具，所述上半模具和下半模具均采用3D打印得到，所述上半模具的上底座为扁平圆柱状且直径为4cm、高为0.2cm，所述上底座上的半球体半径为0.3cm，所述半球体上设有圆柱体的微孔企鹅直径为0.2cm、高为1.5cm，所述微孔之间的间隔为0.3cm，所述下半模具的下底座为扁平圆柱且直径为4cm、高为0.2cm，所述下底座上的半球体半径为0.3cm。

作为对本发明的进一步改进，所述培养液为1ug/ml EGCG的10%FBS (胎牛血清)的DEME(含各种氨基酸和葡萄糖)。

作为对本发明的进一步改进，所述人工取出毛囊具体过程为将 hsf细胞(人皮肤成纤维细胞)弃上清，留沉淀，将离心后的hsf细胞与matrigel基质胶充分混合，将混合好的基质倒圆柱体微环境培养结构中，在下部分培养基凹槽中加入DPC细胞，在上部分培养基微孔中加入hacat细胞。

作为对本发明的进一步改进，所述步骤4中的施加外力手段为给微环境培养结构外部施加一定压力，在构建好的微环境培养结构六面贴上ITO玻璃板，在ITO玻璃板上施加1~10N/cm2压强的压力，体系外部施加压力增加细胞之间的接触,调节毛干生长过程的粗细程度。

作为对本发明的进一步改进，所述步骤5中加入刺激电流具体为在微环境培养结构圆柱孔中的10%FBS的DMEM培养液外部的ITO玻璃板上接通电刺激仪器,通入10ua~50ua强度电流，刺激毛囊细胞的生长。

作为对本发明的进一步改进，在刺激仪器上加入负反馈电路，在负反馈电路中加入运算放大器作为控制器件。

本发明的有益效果在于：通过预先制得培养结构并取下毛囊放入培养液，辅以施加外力及刺激电流，促进毛囊生长，存活率高、生长快培养周期短，有效满足植发需求。