[发明专利]一种体外培养毛囊的方法

权利要求书

1.一种体外培养毛囊的方法，其特征在于：包括1）预先提供模拟毛囊细胞体内生长所需的微环境培养结构，2）预备好可促进毛囊生长的培养液，3）人工取出毛囊并放入微环境培养结构内，再加入培养液，4）对步骤3的微培养结构施加外力手段来调节毛干生长，5）对步骤4内的毛囊加入刺激电流促进毛囊生长。

2.根据权利要求1所述的一种体外培养毛囊的方法，其特征在于：所述微环境培养结构是上半部分为培养基微孔、下半部分为培养基凹槽的模具，所述模具包括上半模具和下半模具，所述上半模具和下半模具均采用3D打印得到，所述上半模具的上底座为扁平圆柱状且直径为4cm、高为0.2cm，所述上底座上的半球体半径为0.3cm，所述半球体上设有圆柱体的微孔企鹅直径为0.2cm、高为1.5cm，所述微孔之间的间隔为0.3cm，所述下半模具的下底座为扁平圆柱且直径为4cm、高为0.2cm，所述下底座上的半球体半径为0.3cm。

3.根据权利要求1所述的一种体外培养毛囊的方法，其特征在于：所述培养液为1ug/mlEGCG的10%FBS (胎牛血清)的DEME(含各种氨基酸和葡萄糖)。

4.根据权利要求1所述的一种体外培养毛囊的方法，其特征在于：所述人工取出毛囊具体过程为将 hsf细胞(人皮肤成纤维细胞)弃上清，留沉淀，将离心后的hsf细胞与matrigel基质胶充分混合，将混合好的基质倒圆柱体微环境培养结构中，在下部分培养基凹槽中加入DPC细胞，在上部分培养基微孔中加入hacat细胞。

5.根据权利要求1所述的一种一种体外培养毛囊的方法，其特征在于：所述步骤4中的施加外力手段为给微环境培养结构外部施加一定压力，在构建好的微环境培养结构六面贴上ITO玻璃板，在ITO玻璃板上施加1~10N/cm2压强的压力，体系外部施加压力增加细胞之间的接触,调节毛干生长过程的粗细程度。

6.根据权利要求1所述的一种体外培养毛囊的方法，其特征在于：所述步骤5中加入刺激电流具体为在微环境培养结构圆柱孔中的10%FBS的DMEM培养液外部的ITO玻璃板上接通电刺激仪器,通入10ua~50ua强度电流，刺激毛囊细胞的生长。

7.根据权利要求6所述的一种体外培养毛囊的方法，其特征在于：在刺激仪器上加入负反馈电路，在负反馈电路中加入运算放大器作为控制器件。