[发明专利]一种表征心肌细胞胞质分裂的动物模型构建方法及应用在审

专利信息
申请号: 202011272031.4 申请日: 2020-11-13
公开(公告)号: CN112375787A 公开(公告)日: 2021-02-19
发明(设计)人: 付文斌;王伟;曾春雨 申请(专利权)人: 中国人民解放军陆军特色医学中心
主分类号: C12N15/90 分类号: C12N15/90;C12N15/873;A01K67/027;A61K49/00
代理公司: 北京同恒源知识产权代理有限公司 11275 代理人: 赵荣之
地址: 400042 重*** 国省代码: 重庆;50
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摘要:
搜索关键词: 一种 表征 心肌 细胞 分裂 动物 模型 构建 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种表征心肌细胞胞质分裂的动物模型构建方法,其特征在于,所述方法为:通过同源重组技术,构建心肌细胞Aurkb基因与荧光标记基因非融合表达的胚胎干细胞,将胚胎干细胞注入动物囊胚中,经培育杂交后筛选出荧光标记Aurkb基因的动物模型,所述非融合表达具体为荧光标记基因在Aurkb基因转录启动子中,并随Aurkb基因的转录而转录。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述动物为啮齿动物。

3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述啮齿动物为小鼠。

4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述荧光标记基因为mCherry、mTagBFP、DsRed或tdTomato中的一种。

5.如权利要求1-4任一项所述的方法,其特征在于,所述非融合表达的产物为荧光标记蛋白和Aurkb蛋白组成的非融合表达蛋白。

6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述胞质分裂通过荧光标记蛋白发光来表征。

7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述非融合表达的方法为将含有荧光标记基因和包含rox位点的终止序列的基因片段插入Aurkb基因转录第一外显子的起始密码子后。

8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,所述基因片段核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

9.权利要求1-8任一项所述的方法获得的动物模型在心肌再生与修复的机制研究中的应用。

10.权利要求1-8任一项所述的方法获得的动物模型在心肌细胞增殖相关靶向药物筛选中的应用。

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