[发明专利]一株抑菌枯草芽孢杆菌微生态制剂制备工艺

权利要求书

1.一株抑菌枯草芽孢杆菌微生态制剂制备工艺，其特征在于包含以下技术步骤：

（1）菌株选用编号QR-KC-008的枯草芽孢杆菌菌株；

（2）斜面母种培养：将采用甘油冻干管保存的枯草芽孢杆菌菌株接种于固体斜面培养基上，40℃培养2d；

（3）三角瓶母种培养：将制备好的斜面母种，在无菌条件下接种，用接种环挑取两环于150mL三角瓶母种培养基中，在40℃，150r/min培养1.5d，制得一级三角瓶种子液；

（4）扩大培养：将一级种子液以2.5%的接种量（体积百分比），接接种到5L种子液体培养基中，在40℃，150r/min培养1.5d，制得二级三角瓶种子液；

（5）50L液体种子罐种子液制备：将二级三角瓶种子液已2.5%（体积百分比）的接种量接种到50L液体种子罐培养基中，于42℃，罐压0.05MPa，通气量2.5m³/h条件下培养24-26h；

（6）500L液体种子罐发酵种子液制备：将50L液体种子罐种子液以2.5%（体积百分比）的接种量接种到500L液体种子罐中，于42℃，罐压0.05MPa，通气量30m³/h条件下培养24-26h；

（7）10T发酵培养：将500L液体种子罐发酵种子液按照2.5%（体积百分比）的接种量接种到10T发酵罐中，于42℃，罐压0.05MPa，通气量50m³/h条件下培养24-26h；

（8）本发明提供了枯草芽孢杆菌微生态制剂制备方法，具体步骤为：以2%海藻酸钠、卡波胶0.5%为壁材，用菌株QR-KC-008发酵离心菌泥浆溶解，边加边搅拌，加入0.15%的吐温80，250r/min搅拌15min，再加入中药提取浓缩液、壳聚糖，4%氯化钙作为固化剂继续固化，直至细腻均匀无颗粒，即得本发明微生态制剂；

（9）本发明提供了枯草芽孢杆菌芽孢菌剂制备方法：具体步骤：步骤（7）发酵培养至产孢率达到95%左右，终止发酵，85℃灭活菌体，添加喷干保护剂，在进风口温度215-230℃、出风口温度92-98℃，发酵液流量500L/h，负压-0.65-0.75KPa条件下喷雾干燥，收料口收集物料。

2.根据权利要求1所述的一株抑菌枯草芽孢杆菌微生态制剂制备工艺，其特征在于所述述步骤（3）和（4）中，所述三角瓶种子液体培养基的配方为：按质量百分比计，葡萄糖2%，蛋白胨0.5%，酵母膏0.1%，硫酸镁0.02%，磷酸二氢钾0.15%，氯化钠1%，pH7.0。

3.根据权利要求1所述的一株抑菌枯草芽孢杆菌微生态制剂制备工艺，其特征在于所述步骤（5）和（6）中，所述种子罐培养基配方为：按照质量百分比计：葡萄糖2%、牛肉膏0.8%，蛋白胨0.5%，氯化钠0.1%， K₂HPO₄ 0.5%，pH7.0。

4.根据权利要求1所述的一株抑菌枯草芽孢杆菌微生态制剂制备工艺，其特征在于所述步骤（2）中所述斜面培养基为上述（4）中所述液体培养基中添加2%的琼脂粉。