[发明专利]一种快速测定茶叶12种水浸出物的方法

说明书

本发明涉及茶叶水浸出成分测定方法技术领域，且公开了一种快速测定茶叶12种水浸出物的方法，包括以下步骤：1)称取1.00g粉碎茶样(过40目筛网)于100mL锥形瓶中，加入100mL90℃的超纯水；2)立即放入90℃水浴中超声提取20min，提取完成后，静置，冷却室温；该快速测定茶叶12种水浸出物的方法，茶叶水浸出成分中多种成分同时测定，简化了检测方法，缩短检测时间，提高检测效率，以茶叶12种水浸出成分为代表建立了UPLC分析方法，可以同时快速对茶氨酸、茶多酚和生物碱进行测定；所述测方法所述测定方法准确，灵敏度高，重复性好，结果可靠，为茶叶品质鉴定、质量控制和茶水浸出物分析提供科学依据。

技术领域

本发明涉及茶叶水浸出成分测定方法技术领域，具体为一种快速测定茶叶12种水浸出物的方法。

背景技术

茶叶中含有多种多酚类物质、氨基酸和生物碱等活性成分。茶叶中多酚类物质含量较高，占其质量的15％～30％，多酚类物质中又儿茶素类化合物含量最高，占茶多酚总量的60％～80％，具有抗氧化和清除自由基的作用。茶叶中氨基酸以茶氨酸含量最高，占整个游离氨基酸的70％，是茶叶中生津润甜的主要成份。生物碱是茶树重要的代谢产物，其中咖啡碱和可可碱含量较高。

目前对茶主成份测定报导较多，但对茶叶水浸出成分测定较少，已有的文献报道主要分为两大类，一类是总量测定，主要有分光光度法、氧化滴定法和近红外光谱法等，这些方法只能测定一类物质量的总和，不能分别定量。另一类组分定量，主要是高效液相色谱法(HPLC)，该方法存在分析速度慢，结构相似的组分分离度低，一次进样分离的组分少等不足。

超高效液相色谱法(UPLC)检测的优越性体现在UPLC在分析速度、分离度、灵敏度方面与传统的高效液相色谱(HPLC)有明显提高，因此需要开发一种快速测定茶叶12种水浸出物的方法。

发明内容

(一)解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了一种快速测定茶叶12种水浸出物的方法，具备可快速测定茶叶水浸出成分的优点，解决了传统测定方法存在的分析速度慢，结构相似的组分分离度低，一次进样分离的组分少等问题。

(二)技术方案

为实现上述可快速测定茶叶水浸出成分的目的，本发明提供如下技术方案：一种快速测定茶叶12种水浸出物的方法，包括以下步骤：

1)称取1.00g粉碎茶样(过40目筛网)于100mL锥形瓶中，加入100mL 90℃的超纯水；

2)立即放入90℃水浴中超声提取20min，提取完成后，静置，冷却室温；

3)用超纯水定溶100ml，4500r/min离心5min后取上层清液，过0.22μm滤膜，备用；

4)取3)中过滤后的清液采用超高效液相色谱二级管阵列检测法同时快速测定茶叶12种水浸出成分；

5)根据所述12种浸出成分各自的标准曲线得到茶叶样品水浸出成分中的12种物质的含量。

优选的，所述1)中超高效液相色谱二级管阵列检测法的色谱条件为：

a)采用waters ACQUITYUPLC BEH C18色谱柱，柱温为30℃，

b)以乙腈和0.01％磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱，进样量为2μL，流动相流速为0.3mL/min，检测波长为210nm。

优选的，所述茶叶12种水浸出成分为：表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、没食子酸(GA)、儿茶素没食子酸酯(CG)、表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素(EGC)、儿茶素(C)、没食子儿茶素(GC)、茶氨酸(L-Theanine)、咖啡因(CAF)、可可碱(THE)。