[发明专利]一种快速测定茶叶12种水浸出物的方法

权利要求书

1.一种快速测定茶叶12种水浸出物的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)称取1.00g粉碎茶样(过40目筛网)于100mL锥形瓶中，加入100mL90℃的超纯水；

2)立即放入90℃水浴中超声提取20min，提取完成后，静置，冷却室温；

3)用超纯水定溶100ml，4500r/min离心5min后取上层清液，过0.22μm滤膜，备用；

4)取3)中过滤后的清液采用超高效液相色谱二级管阵列检测法同时快速测定茶叶12种浸出成分；

5)根据所述12种浸出成分各自的标准曲线得到茶叶样品水浸出成分中12种物质的含量。

2.根据权利要求1所述的一种快速测定茶叶12种水浸出物的方法，其特征在于，所述1)中超高效液相色谱二级管阵列检测法的色谱条件为：

a)采用waters ACQUITYUPLC BEH C18色谱柱，柱温为30℃；

b)以乙腈和0.01％磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱，进样量为2μL，流动相流速为0.3mL/min，检测波长为210nm。

3.根据权利要求1所述的一种快速测定茶叶12种水浸出物的方法，其特征在于，所述茶叶12种水浸出成分为：表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、没食子酸(GA)、儿茶素没食子酸酯(CG)、表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素(EGC)、儿茶素(C)、没食子儿茶素(GC)、茶氨酸(L-Theanine)、咖啡因(CAF)、可可碱(THE)。

4.根据权利要求2所述的一种快速测定茶叶12种水浸出物的方法，其特征在于，所述梯度洗脱过程中，流动相中乙腈的浓度分别为0～1min，0％乙腈；1～10min，0％～15％乙腈；10～15min，15％乙腈；15～16min，15％～0％乙腈。

5.根据权利要求2所述的一种快速测定茶叶12种水浸出物的方法，其特征在于，所述色谱柱规格为2.1mm×100mm，1.7μm。

6.根据权利要求2所述的一种快速测定茶叶12种水浸出物的方法，其特征在于，所述b)中乙腈和0.01％磷酸水为流动相。

7.根据权利要求2所述的一种快速测定茶叶12种水浸出物的方法，其特征在于，所述b)中提高流动相磷酸水的初始比例，有助茶氨酸保留，当磷酸水小于95％时，茶氨酸不能与溶剂峰分离，当磷酸水初始比例提高100％时，茶氨酸与溶剂峰有效分离。

8.根据权利要求2所述的一种快速测定茶叶12种水浸出物的方法，其特征在于，所述色谱为最优的色谱组合条件，在上述色谱条件下检出限：表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)3.2mg/kg、没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)8.3mg/kg、表儿茶素没食子酸酯(ECG)8.2mg/kg、没食子酸(GA)5.6mg/kg、儿茶素没食子酸酯(CG)8.9mg/kg、表儿茶素(EC)5.1mg/kg、表没食子儿茶素(EGC)10.1mg/kg、儿茶素(C)7.6mg/kg、没食子儿茶素(GC)7.5mg/kg、茶氨酸(L-Theanine)15.6mg/kg、咖啡因(CAF)4.7mg/kg、可可碱(THE)7.9mg/kg。

9.根据权利要求2所述的一种快速测定茶叶12种水浸出物的方法，其特征在于，所述所用试剂均为分析纯，实验用水符合GB/T6682-2008的要求，乙腈：色谱纯，磷酸:分析纯，0.01％磷酸溶液(体积分数)：量取40μL磷酸，加入400mL超纯水中，纯水相孔滤膜(0.22μm)过滤，测试仪器：超高效液相色谱仪(配有四元泵、二极管阵列检测器)，天平：感量为0.0001g，超声波清洗仪，粉碎机，离心机。