[发明专利]一种rhGH中和抗体的检测方法

权利要求书

1.一种rhGH中和抗体的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1：将样品置于50～60℃条件下灭活30～35分钟；所述样品包括待检血清样品、阴性对照样品、阳性对照样品；

步骤2：将灭活后的样品与rhGH工作液混合，在37℃、5％CO₂培养箱中进行孵育，得到中和后的样品；

步骤3：将细胞悬液与中和后的样品混合，在37℃、5％CO₂条件下进行细胞培养；

步骤4：将细胞显色液与培养后的细胞混合，室温下避光静置；

步骤5：采用荧光细胞活性检测系统检测活细胞数目，得到待检血清样品的抑制率，判断待检血清样品中是否存在rhGH中和抗体。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述待检血清样品为采血后于≤-60℃冰箱中储存至少12小时的血清；

所述阴性对照样品为至少5个批次未接受rhGH药物治疗的正常人血清的混合血清；

所述阳性对照样品为rhGH抗体与阴性对照样品的混合物，浓度不小于250ng/mL。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述阳性对照样品包括高质控阳性对照样品和低质控阳性对照样品；

高质控阳性对照样品的浓度为3000～5000ng/mL，低质控阳性对照样品的浓度为250～2500ng/mL。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤2中，rhGH工作液为采用分析培养基稀释的rhGH溶液，rhGH工作液中rhGH的浓度为2～6ng/mL，灭活后的样品与rhGH工作液的体积比为1:(5～15)。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述分析培养基为含有1％～5％FBS和0.5％～1.5％双抗的1640基础培养基。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤2中，孵育的时间为2小时±10分钟，孵育的温度为20～30℃。

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤3中，细胞悬液的密度为(1～10)×10⁵/mL，细胞悬液的基质为分析培养基；

步骤3中，细胞悬液与中和后的样品的体积比为(1～3):1。

8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述细胞培养的时间为45～50h。

9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤4中，避光静置的时间为5～15分钟。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的检测方法，其特征在于，步骤5中，待检血清样品的抑制率不小于低质控阳性对照样品的抑制率，则判断待检血清样品中存在rhGH中和抗体。