[发明专利]一种基于斑马鱼炎症性肠病模型筛选药效物质的方法有效
| 申请号： | 202011239439.1 | 申请日： | 2020-11-09 |
| 公开（公告）号： | CN112245596B | 公开（公告）日： | 2022-01-18 |
| 发明（设计）人： | 王毅;赵璐 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | A61K49/00 | 分类号： | A61K49/00;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 韩聪 |
| 地址： | 310013 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 斑马 炎症 性肠病 模型 筛选 药效 物质 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种基于斑马鱼炎症性肠病模型筛选药效物质的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将待测物质加入到含有受精后24～72h的转基因斑马鱼系Tg(Lyz:DsRed)胚胎的孵育液A中进行24h的预保护，再换液加入含有浓度为75μg/mL的三硝基苯磺酸的孵育液B，继续孵育48h，得到给药模型；
(2)利用与活性氧反应的荧光染料2’,7’-二氢二氯荧光素二乙酸酯对给药模型的斑马鱼胚胎进行处理，荧光成像并分析斑马鱼胚胎肠道区域内的平均荧光强度，与未给药模型组的活性氧水平进行比较，筛选平均荧光强度小于未给药模型组70％的物质为目标物质；
还包括：利用荧光成像计算给药模型斑马鱼胚胎肠道区域内中性粒细胞个数，再根据如下公式计算回调指数，筛选回调指数＞0.6的物质为目标物质；
X＝(nmodel-ndrug)/(nmodel-ncontrol)
其中X-回调指数，nmodel-未给药模型组中性粒细胞个数，ndrug-给药模型组中性粒细胞个数，ncontrol-空白组中性粒细胞个数。
2.如权利要求1所述的基于斑马鱼炎症性肠病模型筛选药效物质的方法，其特征在于，步骤(1)中，设置5～10个重复。
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