[发明专利]一种人诱导多能干细胞及其培养方法和用途在审
申请号: | 202011236912.0 | 申请日: | 2020-11-09 |
公开(公告)号: | CN112481216A | 公开(公告)日: | 2021-03-12 |
发明(设计)人: | 王泰华;王兴昕 | 申请(专利权)人: | 山东新医学中西医结合医学研究院有限公司 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N5/074;C12N15/17;C12N15/12;A61K35/545;A61P3/10 |
代理公司: | 北京市广友专利事务所有限责任公司 11237 | 代理人: | 张仲波 |
地址: | 250101 山东省济南市高新*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 诱导 多能 干细胞 及其 培养 方法 用途 | ||
1.一种人诱导多能干细胞,其特征在于,所述人诱导多能干细胞转染有人雌激素相关受体γ基因和/或人胰岛素基因。
2.一种培养权利要求1所述的人诱导多能干细胞的方法,其特征在于,所述方法包括:使用人雌激素相关受体γ基因和/或人胰岛素基因对人多能脂肪干细胞进行转染处理,得到所述人诱导多能干细胞。
3.根据权利要求2所述的方法,其中,所述人多能脂肪干细胞为脂肪间充质干细胞或分泌胰岛素的间充质干细胞中的至少一种。
4.根据权利要求2所述的方法,其中,所述人多能脂肪干细胞的提取方法如下:
S1:通过胶原酶时间梯度消化法分离提取出原代脂肪间充质干细胞;
S2:将所述原代脂肪间充质干细胞通过贴壁法用培养基筛选出脂肪间充质干细胞;
S3:通过单克隆培养法培养多代所述脂肪间充质干细胞,筛选得到所述人多能脂肪干细胞。
5.根据权利要求2所述的方法,其中,所述转染处理为慢病毒转染处理。
6.根据权利要求2所述的方法,其中,所述慢病毒转染处理包括:慢病毒载体的克隆构建、慢病毒载体DNA的纯化、慢病毒载体的生产包装以及慢病毒载体的感染。
7.根据权利要求4所述的方法,其中,步骤S1中,所述胶原酶时间梯度为18-22min。
8.根据权利要求4所述的方法,其中,步骤S2中,所述培养基为间充质干细胞无异种成分培养基;以所述培养基为基准,干细胞因子的浓度为10ng/mL,非必需氨基酸的含量为1体积%,胰岛素-转铁蛋白-硒的含量为1体积%。
9.一种用于治疗糖尿病的药物,该药物含有权利要求1所述的人多能干细胞或采用权利要求2~8中任意一项所述的方法培养得到的所述人多能干细胞。
10.权利要求1所述的人多能干细胞或采用权利要求2~8中任意一项所述的方法得到的所述人多能干细胞在制备用于治疗糖尿病的药物中的用途。
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