[发明专利]硫利达嗪的检测方法有效
| 申请号: | 202011228084.6 | 申请日: | 2020-11-06 |
| 公开(公告)号: | CN112305135B | 公开(公告)日: | 2022-08-12 |
| 发明(设计)人: | 张国成;贾永娟;倪君君 | 申请(专利权)人: | 北京和合医学诊断技术股份有限公司 |
| 主分类号: | G01N30/06 | 分类号: | G01N30/06;G01N30/74 |
| 代理公司: | 济南信达专利事务所有限公司 37100 | 代理人: | 李世喆 |
| 地址: | 101111 北京市北京经济技术开发区经*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 硫利达嗪 检测 方法 | ||
1.硫利达嗪的检测方法,其特征在于,包括:
制备至少三种浓度的标准溶液,其中,所述标准溶液为具有硫利达嗪、内标物以及未含有硫利达嗪的空白样本的溶液,所述至少三种浓度的标准溶液中的内标物的量相同;
利用高效液相色谱仪在预设的检测条件下分别检测每一种所述标准溶液,获得每一种所述标准溶液对应的第一检测结果;
根据各个所述第一检测结果、所述标准溶液中硫利达嗪的浓度和内标物的浓度,拟合硫利达嗪的标准曲线方程;
对待处理样品进行离心处理,取离心后的第一上清液;
向所述第一上清液内加入内标物,涡旋混匀,顺次加入萃取剂,对所述第一上清液进行萃取,得到待测样品;
利用高效液相色谱仪在所述检测条件下检测所述待测样品,获得所述待测样品的第二检测结果;
基于所述标准曲线方程和所述第二检测结果,得到所述待测样品中硫利达嗪的浓度;
第一上清液为血清或血浆;
所述检测条件中的液相条件,包括:
C18反相色谱柱;
洗脱流动相中的水相与有机相的体积比为35:65 -45:55;
洗脱流动相中的水相包括:含有三乙胺和乙酸铵的水溶液;
洗脱流动相中的有机相包括:乙腈溶液;
柱温为45-55℃;
流速为0.2-0.4 mL/min;
所述向所述第一上清液内加入内标物,涡旋混匀,顺次加入萃取剂,对所述第一上清液进行萃取,得到待测样品,包括:
向所述第一上清液内加入内标物,在2300-2700 rpm的转速下涡旋混合1-2 min;
顺次加入萃取剂,在2300-2700 rpm的转速下涡旋混合8-12 min,并在10000-15000rpm的转速下高速离心3-7 min,移取离心后的第二上清液;
利用氮气将移取的所述第二上清液吹干,顺次加入复溶液,在2300-2700 rpm的转速下涡旋混合2-4 min,并在10000-15000 rpm的转速下离心4-6 min,取第三上清液作为待测样品;
所述萃取剂为正己烷;
所述内标物为赛庚定。
2.根据权利要求1所述的硫利达嗪的检测方法,其特征在于,
所述检测条件中的紫外检测条件,包括:
紫外检测器的检测波长为295-305 nm。
3.根据权利要求1所述的硫利达嗪的检测方法,其特征在于,
所述标准曲线方程的两个变量分别为:所述标准溶液中硫利达嗪的色谱峰面积与内标物的色谱峰面积的比值,以及所述标准溶液中硫利达嗪的浓度与内标物的浓度的比值。
4.根据权利要求1所述的硫利达嗪的检测方法,其特征在于,
所述复溶液包括:含有40-60%甲醇的水溶液。
5.根据权利要求1所述的硫利达嗪的检测方法,其特征在于,
所述第一上清液与所述复溶液的体积比为:1:0.8-1:1.2。
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