[发明专利]一种比率型量子点ECL适配体传感器及其制造方法

权利要求书

1.一种比率型量子点ECL适配体传感器，包括阴极电极和阳极电极，其特征在于：所述阴极电极为硒化镉量子点，所述阳极电极为改性的钌硅粒子（RuSi@Ru（bpy）32+），所述阴极电极与所述阳极电极之间通过两条链接链相连接。

2.根据权利要求1所述的一种比率型量子点ECL适配体传感器，其特征在于：两条所述链接链分别为辅助链和捕获链。

3.根据权利要求1所述的一种比率型量子点ECL适配体传感器的制造方法，其特征在于：包括如下步骤：

S1、合成L-半胱氨酸包封的硒化镉量子点，包括如下步骤：

S1.1、将CdCl2·2.5H2O与L-半胱氨酸（其摩尔比为1:3）和150 mL去离子水混合，用0.1mol L-1 NaOH将pH值调至10，在氮气的保护下进行磁力搅拌反应，得到镉（Cd）源；

S1.2、同时在圆底烧瓶中加入Se: NaBH4=1:1.5（摩尔比）和10 mL去离子水加热到40℃，充满氮气反应30分钟，合成硒（Se）源；

S1.3、将合成的前驱体硒（Se）源加入到镉（Cd）源中，90℃冷凝回流反应60min，最后用乙醇沉淀、离心，乙醇洗涤三次，产品在水中溶解后，置于避光4℃的冰箱中保存；

S2、合成RuSi@Ru（bpy）32+复合物，包括如下步骤：

S2.1、首先将1.77 mL的Triton X-100、7.5 mL的环己烷、1.8 mL的1-己醇以及340 μL的Ru（bpy）32+（40mM）通过磁搅拌混合形成油包水微乳液；

S2.2、再加入100μL的四乙硅酸盐（TEOS）和60μL的NH4OH，水解反应持续24 h后，加入10mL丙酮破坏乳状液，9500 rpm离心，乙醇和水洗涤后，用10%的APTES乙醇溶液对得到的橙红色的RuSi NPs进行处理2小时，形成氨基功能化的RuSi NPs；

S2.3、然后用乙醇冲洗纳米颗粒以去除松散结合的APTES，并在超纯水中重新分散；

S2.4、10μL的Ru（bpy）32+（1wt%）、NHS和500μL步骤S2.3中得到的氨基功能化RuSi NPs溶液在室温下搅拌24 h后，离心洗去多余的Ru（bpy）32+和NHS，然后重新分散在500μL超纯水中，获得RuSi@Ru（bpy）32+复合材料；

S3、比率ECL适配体传感器的组装与检测，包括如下步骤：

S3.1、首先，用0.3和0.05μm的氧化铝对裸露的GCE进行抛光，得到镜面状表面，然后分别在去离子水和乙醇中进行超声处理，氮气吹干待用；

S3.2、然后，将制备好的12μLCdSeQDs悬浮液滴加GCE裸表面，在空气中干燥，形成均匀的膜；

S3.3、随后，加入10μL2.5μM辅助探针（APs）在37℃孵育1 h，再加入10μLRuSi@Ru （bpy）32+标记的捕获探针（CPs）在37℃孵育2h，每一步修饰后，在去离子水中静洗；

S3.4、完成组装后，进行比率ECL适配体传感器的检测，检测在MPI-E型电致化学发光检测仪中进行，利用传统的三电极系统GCE作为工作电极，饱和银/氯化银作为参比电极，铂丝为对电极，20mL0.1MPBS（pH7.0），包含0.1 MK2S2O8和30mMTPrA，扫描范围为-1.6~+1.4 V，扫描速率为0.1V/s，光电倍增管（PMT）电压为900V。

4.根据权利要求3所述的一种比率型量子点ECL适配体传感器的制造方法，其特征在于：检测时在pH=7.0的磷酸盐缓冲溶液中加入双共反应剂，能够克服互相影响，产生阴阳极ECL发光。

5.根据权利要求4所述的一种比率型量子点ECL适配体传感器的制造方法，其特征在于：所述双共反应剂为过硫酸钾和三正丙胺。