[发明专利]一种从桦褐孔菌中提取分离栓菌酸的方法

权利要求书

1.一种提取分离纯化栓菌酸的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

S1、粉碎桦褐孔菌子实体，加入异丙醇水溶液中，浸泡后加入层析柱中，异丙醇水溶液洗脱，得粗提取液， 所述异丙醇水溶液浓度均为50-70%；

S2、提取液减压回收异丙醇，乙酸乙酯萃取合并，减压回收得干粉；

S3、干粉装入有 C18 修饰硅胶填充层析柱，采用梯度醇溶液洗脱，收集100％醇溶液洗脱时的主要洗脱峰；

S4、减压回收醇溶液后，浓缩液冷冻干燥得栓菌酸冻干粉。

2.权利要求 1 所述的提取分离纯化栓菌酸的方法，其特征在于，所述 S1 为：将桦褐孔菌子实体粉碎，按 1kg:1～5L 料液比的加入到异丙醇水溶液中浸泡，浸泡0.4-0.6h 后加入层析柱中，采用异丙醇水溶液洗脱 1 个柱体积，得到粗提取液；所述洗脱的流速为1BV/h，总洗脱时间为 1h。

3.权利要求 1-2 任一所述的提取分离纯化栓菌酸的方法，其特征在于，S1 中所述层析柱的柱直径：柱床高度=1:5。

4.权利要求 1-2任一所述的提取分离纯化栓菌酸的方法，其特征在于，所述 S2 为：将提取液 50-55℃减压回收异丙醇，加入等体积乙酸乙酯萃取合并，减压回收乙酸乙酯得干粉。

5.权利要求4所述的提取分离纯化栓菌酸的方法，其特征在于，当减压浓缩为提取液体积 1/2 后加入等体积的乙酸乙酯萃取 3 次，每次30min，合并上层乙酸乙酯相，55-60℃减压回收乙酸乙酯得干粉。

6.权利要求 1-2任一所述的提取分离纯化栓菌酸的方法，其特征在于，S3 中干粉按5%柱填料质量装入层析柱中。

7.权利要求 4所述的提取分离纯化栓菌酸的方法，其特征在于，S3 中所述 C18修饰硅胶为球形，粒径为 20-45µm，所述层析柱的柱直径与柱床高度比为 1:10～1:30。

8.权利要求7所述的提取分离纯化栓菌酸的方法，其特征在于，S3 中所述醇溶液为甲醇或乙醇溶液。

9.权利要求7所述的提取分离纯化栓菌酸的方法，其特征在于，S3 中所述采用梯度醇溶液洗脱为醇溶液以 5BV/h 的流速梯度洗脱 2h，收集 100%醇溶液洗脱时的主洗脱峰，所述具体洗脱梯度如下：

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10.权利要求1所述的提取分离纯化栓菌酸的方法，其特征在于，所述S4 为 100%醇溶液洗脱峰在 60℃减压回收醇溶液后，浓缩液-80℃冷冻干燥得栓菌酸冻干粉。