[发明专利]宝乐果及其制品中标志性成分Borojo-8,9-环烯醚萜苷的微量分析方法

说明书

本发明公开了宝乐果及其制品中标志性成分Borojo‑8,9‑环烯醚萜苷的微量分析方法，包括如下步骤：步骤1：Borojo原果的前处理；步骤2：Borojo酶解浓缩粉的前处理；步骤3：宝乐果发酵果酒的前处理；步骤4：含宝乐果成分饮料的前处理；步骤5：含宝乐果成分糕点、面包和饼干的前处理；步骤6：含宝乐果成分化妆品的前处理。本发明对多种不同基质的宝乐果产品中微量标志活性物的分析测试，排除了不同产品中类成分干扰，质谱分析引入了内标的使用。同时建立了液相色谱分析技术，确保对宝乐果产品中微量目标物的再现分析及其结果的准确性。

技术领域

本发明涉及一种测定方法，特别涉及宝乐果及其制品中标志性成分Borojo-8,9-环烯醚萜苷的微量分析方法。

背景技术

宝乐果(中文名)(西班牙名Borojo)是一种生长在南美洲热带雨林的水果，它只适应南美洲厄瓜多尔气候生长，茜草科林果属植物。Borojo果实直径达到7-12厘米，未成熟时绿色，成熟后转为茶褐色，重量700-1000克/只，果肉柔软，味酸且粘稠，去种子后果肉重量占88％。宝乐果具有一种特别的独有的香气，浓郁而久长。长久以来，当地土著人因其富含营养和促进健康的效果而将其视为珍宝，有着几千年的食用习惯。宝乐果营养丰富，含多糖、多酚、总黄酮、萜类、植物油、多种矿物质、多种维生素、稀土元素，蛋白质、必需氨基酸等成分，其自身营养成分配制比例同人类相近，适合人类吸收利用，美国人称其为“21世纪超级水果”。

经国际检索，2008年美国新泽西州立大学(RUTGERS)食品技术发展中心报道，在Borojo植物图谱中发现一个分子量为388的物质。认为是唯一一个先前未经确认的、含量丰富的、新奇的、“单一多酚类”物质。该实验室优化采用ISO14502-1/2:2005《SOP植物中茶多酚的检验方法--分光光度法》的方法进行分析，每100g Borojo sorbilis Cuatrec冻干粉中检出茶多酚(以没食子酸计gallic acid)0.323g。

2010年8月11日www.nutropical.com网站报道了Secaucus NJ(PRWEB)的文章：Borojo sorbilis Cuatrec研究结果发现，Borojo sorbilis Cuatrec中只含有一种多酚并相对浓度很高，这在植物界是独一无二的具有革命性意义。

2010年中国以焦红教授为核心的食品研究技术团队受南美华侨委托，对Borojosorbilis Cuatrec全营养成分、食物安全性和营养功效进行了全面的研究。2013年同中国科学院华南植物园合作，鉴定并给Borojo sorbilis Cuatrec命名中文名宝乐果。2014年申请宝乐果粉进入中国新食品原料行政审批。2017年第7号公告被国家卫计委批准为：中国新食品原料宝乐果粉。

早在2011年，焦红的团队优化提取了宝乐果中丰度极高、单一分子量的、被美国学者成为“多酚”的物质，采用高分辨质谱、核磁共振以及红外光谱3种方法对宝乐果中高含量天然活性物进行了分子结构的鉴定。得出结果：

1.高分辨质谱HPLC-MS/MS全扫描，仪器：API 3200Qtrap，离子扫描模式：EI

①ESI-负离子扫描，保留时间为2.79min，重现了(RUTGERS)食品技术发展中心确认的为“单一多酚类”的成分，分子量为388。在扫描图谱中，该物质极性最强。共流出物质中还有一个m/z 775.5的物质，推断是388二聚体775.5(2M-H)，如图1所示。

②对二聚体M/Z 775.5特殊扫描确证，判断其二级碎片峰为M/Z 387(M-H-)，脱羧峰为M/Z 343(M-C02-H-)。

③对M/Z 387(M-H-)和M/Z 343(M-H20-H-)及其所有碎片进行特殊扫描确证，推断M/Z 343(M-H20-H-)可脱掉六碳糖。该扫描效果的丰度远胜于(RUTGERS)食品技术发展中心的碎片峰图。