[发明专利]宝乐果及其制品中标志性成分Borojo-8,9-环烯醚萜苷的微量分析方法

权利要求书

1.宝乐果及其制品中标志性成分Borojo-8,9-环烯醚萜苷的微量分析方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：Borojo原果的前处理

称取10g样品至烧杯中，加入100mL 60％甲醇水，搅拌均匀，用锡纸纸封住烧杯口，然后90摄氏度水浴加热30分钟，取出烧杯冷却至室温后，离心取上清液，用0.22μm的超滤膜过滤，进高效液相色谱仪检测；

步骤2：Borojo酶解浓缩粉的前处理

称取1.0g样品至烧杯中，用60％甲醇水溶解定容至100ml，摇匀，用0.22μm的超滤膜过滤，滤液用60％甲醇水溶液稀释1000倍后，进高效液相色谱仪检测；

步骤3：宝乐果发酵果酒的前处理

称取1.0g样品于烧杯中，60℃热水中水浴20min，挥发其中乙醇，待样液温度降至室温后，用60％甲醇水溶液定容至25ml，摇匀，用0.22μm的超滤膜过滤，滤液用60％甲醇水溶液稀释相应倍数后，进高效液相色谱仪检测；

步骤4：含宝乐果成分饮料的前处理；

步骤5：含宝乐果成分的糕点、面包和饼干的前处理

将样品用粉碎机粉碎或剪碎后，充分搅拌均匀，称取约1.0g样品于烧杯中，加入20ml石油醚，搅拌均匀，放置分层后，倒掉石油醚层，重复操作2次，充分去除样品中脂肪，挥干石油醚后，加入约20ml60％甲醇水溶液，超声提取30min，待溶液冷却至室温后将上层溶液转移至25ml容量瓶中，并用少量60％甲醇水溶液洗涤残渣，洗液并入容量瓶中，用60％甲醇水溶液定容至刻度，摇匀，进高效液相色谱仪检测；

步骤6：含宝乐果成分化妆品的前处理。

2.如权利要求1所述的宝乐果及其制品中标志性成分Borojo-8,9-环烯醚萜苷的微量分析方法，其特征在于，步骤4包括液体样品的前处理和固体样品的前处理两个部分，其中：

(1)液体样品的前处理

称取1.0g样品于25ml容量瓶中，加入约20ml的60％甲醇水溶液，超声提取10min，待液体温度降至室温后，用60％甲醇水溶液定容至刻度，摇匀，用0.22μm的超滤膜过滤，滤液用60％甲醇水溶液稀释相应倍数后，进高效液相色谱仪检测；

(2)固体样品的前处理

称取0.5g-1.0g样品于25ml容量瓶中，加约5.0ml的水，涡旋震荡，充分将样品溶解，溶解后加入约15.0ml的60％甲醇水溶液，摇匀，超声提取10min-15min，待液体温度降至室温后，用60％甲醇水溶液定容至刻度，摇匀，用0.22μm的超滤膜过滤，滤液用60％甲醇水溶液稀释相应倍数后，进高效液相色谱仪检测。

3.如权利要求1所述的宝乐果及其制品中标志性成分Borojo-8,9-环烯醚萜苷的微量分析方法，其特征在于，步骤6包括不含蜡质样品的前处理和含蜡质样品的前处理两个部分，其中：

(1)不含蜡质样品的前处理

称取2.5g样品于10.0ml比色管中，用5.0ml纯净水溶解，超声30分钟，待试液温度降至室温，用60％甲醇水定容至刻度，摇匀，用0.22μm的超滤膜过滤，进高效液相色谱仪检测；

(2)含蜡质样品的前处理

称取2.5g样品于10.0ml比色管中，用1ml四氢呋喃溶解，再加入4ml甲醇，在涡旋振荡器上高速震荡5min，超声30分钟，待试液温度降至室温，用甲醇定容至刻度，摇匀，用0.22μm的超滤膜过滤，进高效液相色谱仪检测。