[发明专利]检测更昔洛韦眼用凝胶中更昔洛韦和有关物质的方法

权利要求书

1.一种检测更昔洛韦眼用凝胶中更昔洛韦和/或有关物质的方法，包括如下步骤：

(1)取更昔洛韦眼用凝胶样品，每2-3g样品加0.3-0.5％氢氧化钠溶液0.4-0.6ml和2％-3％硫酸镁溶液0.8-2ml，析出沉淀；优选地，搅拌以使沉淀加快析出并凝结；

(2)将沉淀与溶液相分离；

(3)将沉淀用流动相A洗涤一次或多次(优选3-5次)，洗涤下来的液体与步骤(2)中的溶液合并，得到合并液；其中流动相A为水或者浓度小于或等于5％的甲醇溶液；

(4)将合并液用HPLC方法进行分析；

HPLC方法的条件如下：

色谱柱为C18反相硅胶柱；

柱温30℃-40℃；

流动相A为水或者浓度小于或等于5％的甲醇溶液；

流动相B为甲醇；

流速0.5-1.5mL/min；

进样量35-45μL；

检测波长252nm；

其中，

所述有关物质包括选自如下的杂质A-杂质F中的任意1种或多种：

2.根据权利要求1所述的检测方法，其中，步骤(1)中，每2-3g样品加0.3-0.5％氢氧化钠溶液0.4-0.6ml和2.4％-2.6％硫酸镁溶液0.8-1.5ml或0.8-1.2ml。

3.根据权利要求1至2中任一权利要求所述的检测方法，其中，步骤(1)中，每2.5g样品加0.3-0.5％氢氧化钠溶液0.4-0.6ml和2.4％-2.6％硫酸镁溶液0.8-1.5ml或0.8-1.2ml。

4.根据权利要求1至3中任一权利要求所述的检测方法，其中，步骤(1)中，每2.5g样品加0.4％氢氧化钠溶液0.5ml和2.5％硫酸镁溶液1ml。

5.根据权利要求1至4中任一权利要求所述的检测方法，其中步骤(4)中，其特征在于如下①-④项中的任意一项或者多项：

①所述色谱柱为Waters Atlantis T3；优选地，色谱柱的参数为4.6mm x 250mm,5.0μm；或者为4.6mm x 250mm,10.0μm；

②柱温为32℃-38℃、34℃-36℃或35℃；

③流速为0.8-1.2mL/min或1.0mL/min；

④进样量为38-42μL或40μL。

6.根据权利要求1至6中任一权利要求所述的检测方法，其中步骤(1)和/或步骤(4)中，流动相A为1％-5％甲醇溶液或者3％甲醇溶液；优选地，步骤(1)和/或步骤(4)中的流动相A相同。

7.根据权利要求1至6中任一权利要求所述的检测方法，其中步骤(4)中HPLC的条件如下：

色谱柱为Waters Atlantis T3；

柱温35℃；

流动相A为3％甲醇溶液；

流速1.0mL/min；

进样量40μL；

检测波长252nm。

8.根据权利要求1至7中任一权利要求所述的检测方法，其中步骤(4)中，洗脱程序如下：

9.根据权利要求1至8中任一权利要求所述的检测方法，其中，所述更昔洛韦眼用凝胶包括更昔洛韦和卡波姆；例如BauschLomb Incorporated生产的更昔洛韦眼用凝胶。

10.一种更昔洛韦眼用凝胶质控方法，包括利用权利要求1-9中任一权利要求所述的检测方法检测更昔洛韦眼用凝胶中更昔洛韦含量和/或有关物质含量的步骤。