[发明专利]一种肠道病毒通用型核酸检测试剂盒

权利要求书

1.一种肠道病毒通用型核酸检测试剂盒，其特征在于：包括核酸扩增反应液、酶混合液、肠道病毒通用型反应液、阳性对照和阴性对照，所述肠道病毒通用型反应液设有内参。

2.根据权利要求1所述的一种肠道病毒通用型核酸检测试剂盒，其特征在于：所述核酸扩增反应液包括核苷酸混合液、Buffer、MgCl₂溶液和DEPC水。

3.根据权利要求1所述的一种肠道病毒通用型核酸检测试剂盒，其特征在于：所述酶混合液包括UNG酶5U/μL、DNA聚合酶2.5U/μL、逆转录酶200U/μL、RNA酶抑制剂40U/μL和酶稀释液。

4.根据权利要求1所述的一种肠道病毒通用型核酸检测试剂盒，其特征在于：所述肠道病毒通用型反应液包括肠道病毒通用型上游引物、肠道病毒通用型下游引物、肠道病毒通用型探针、内参RNase P上游引物、内参RNase P下游引物、内参RNase P探针和DEPC水。

5.根据权利要求1所述的一种肠道病毒通用型核酸检测试剂盒，其特征在于：所述阳性对照包括肠道病毒通用型病毒样颗粒、RNase P病毒样颗粒和TE Buffer，所述阴性对照为0.9％的氯化钠溶液。

6.根据权利要求4所述的一种肠道病毒通用型核酸检测试剂盒，其特征在于：所述肠道病毒通用型上游引物序列为CTTTGGGTGTCCGTGTTTCC，肠道病毒通用型下游引物序列为GGCCAATCCAATAGCTATATGG，肠道病毒通用型探针序列为AATTCTTTAATTGTCACCATAAGCAGCCAATA。

7.根据权利要求4所述的一种肠道病毒通用型核酸检测试剂盒，其特征在于：所述内参RNase P上游引物的序列为FAGATTTGGACCTGCGAGCG，所述内参RNase P下游引物的序列为RGAGCGGCTGTCTCCACAAGT，所述内参RNase P探针的序列为PTTCTGACCTGAAGGCTCTGCGCG。

8.一种肠道病毒通用型核酸检测试剂盒的使用方法，其特征在于，包括如下步骤：

S100、预处理，分别取出核酸扩增反应液、酶混合液、肠道病毒通用型反应液、阳性对照和阴性对照，并在室温下融化，充分振荡混匀后瞬间离心；

S200、配置反应液并放在PCR反应管中，每个PCR反应管中20μL；

S300、提取核酸；

S400、加样，在步骤S200配置的反应液中分别加入待测样本、阳性对照和阴性对照核酸各5μL，盖紧管盖，瞬时离心；

S500、扩增检测，将步骤S400得到的PCR反应管放置在荧光定量PCR仪中进行扩增检测；

S600、结合内参检测结果判断样本检测结果。

9.根据权利要求8所述的一种肠道病毒通用型核酸检测试剂盒的使用方法，其特征在于：所述步骤S200中的配置反应液为核酸扩增反应液12μL/人份、酶混合液4μL/人份、肠道病毒通用型反应液4μL/人份。

10.根据权利要求8所述的一种肠道病毒通用型核酸检测试剂盒的使用方法，其特征在于，所述步骤S500中的荧光定量PCR仪的扩增检测循环参数如下：

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