[发明专利]一种检测生物制品中异嗜性小鼠白血病病毒的方法有效
申请号: | 202011176128.5 | 申请日: | 2020-10-29 |
公开(公告)号: | CN112011648B | 公开(公告)日: | 2021-01-15 |
发明(设计)人: | 范培培 | 申请(专利权)人: | 苏州良辰生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851 |
代理公司: | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人: | 周敏 |
地址: | 215613 江苏省苏州市张家*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 生物制品 中异嗜性 小鼠 白血病病毒 方法 | ||
1.一种检测生物制品中异嗜性小鼠白血病病毒的方法,其特征在于,以待检测生物制品中的RNA为RNA模板,采用上游引物、下游引物和标记有荧光基团的探针进行荧光定量PCR反应,采集荧光信号以确定所述待检测生物制品中的异嗜性小鼠白血病病毒的含量;其中,
所述上游引物的序列为cccttaaagataagattaaccc;
所述下游引物的序列为ctctccaagtaacattgaag;
所述探针的序列为cgttgtaccgaggctcctgc;
所述探针的序列的5’端修饰有荧光报告基团,3’端修饰有荧光淬灭基团;
所述的荧光报告基团为FAM;所述的荧光淬灭基团为TAMRA或BHQ。
2.根据权利要求1所述的检测生物制品中异嗜性小鼠白血病病毒的方法,其特征在于,确定所述待检测生物制品中的异嗜性小鼠白血病病毒的含量的方法为将采集的所述荧光信号代入标准曲线中进行确定,其中,所述标准曲线是以多个浓度的异嗜性小鼠白血病病毒RNA标准品作为RNA模板,采用所述上游引物、所述下游引物和所述探针对所述RNA模板进行荧光定量PCR反应,采集荧光信号后建立的。
3.根据权利要求2所述的检测生物制品中异嗜性小鼠白血病病毒的方法,其特征在于,所述异嗜性小鼠白血病病毒RNA标准品的序列为cccuuaaagauaagauuaacccguggggcccccuaauaguuauggggaucuuggugagggcaggagccucgguacaacgugacagcccucaccagaucuucaauguuacuuggagag。
4. 根据权利要求2所述的检测生物制品中异嗜性小鼠白血病病毒的方法,其特征在于,所述多个浓度的RNA标准品的浓度分别为2×10 copies/μL、2×102 copies/μL、2×103copies/μL、2×104 copies/μL、2×105 copies/μL、2×106 copies/μL、2×107 copies/μL、2×108 copies/μL、2×109copies/μL中的多个。
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