[发明专利]血液中半挥发性有机物的检测方法

权利要求书

1.一种血液中半挥发性有机物的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)多级萃取：

将0.1-2mL的待检测的血清或血浆样品，加入超纯水稀释1-3倍，加入0.5-2mL乙腈，密闭超声5-30分钟后，加入1-5mL第一溶剂，振动萃取5分钟以上，离心后取上清液，记为第一上清液；所述第一溶剂包括但不限于正己烷、环己烷、异辛烷中的任意一种；

接着，向处理后的血清或血浆样品中再次加入0.1-1mL第二溶剂，振动萃取5分钟以上，离心后取上清液，记为第二上清液；所述第二溶剂包括但不限于二氯甲烷、甲基叔丁基醚、氯仿、乙酸乙酯、甲苯中的任意一种；

将所述第一上清液和所述第二上清液合并，用氮气吹干，接着再用至少100μL第三溶剂复溶，得到复溶样本，待上样；所述第三溶剂包括但不限于正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、异辛烷中的任意一种；

(2)固相萃取柱的去杂、活化：

用1-5mL第四溶剂润洗固相萃取柱，滴干溶剂，弃去润洗液；然后，用1-5mL第五溶剂润洗固相萃取柱，滴干溶剂，弃去润洗液；其中，所述第四溶剂包括但不限于正己烷、或正己烷与二氯甲烷体积比大于等于8：2的正己烷/二氯甲烷混合溶液；所述第五溶剂包括但不限于二氯甲烷、或正己烷与二氯甲烷体积比小于等于1：1的正己烷/二氯甲烷混合溶液；

(3)上样：

将所述步骤(1)得到的所述复溶样本加入到经所述步骤(2)处理得到的所述固相萃取柱中，收集滴下溶液；

(4)洗脱：

待所述步骤(3)中再无溶液滴下后，向所述固相萃取柱中，加入1-3mL所述第四溶剂，滴干溶剂，再加入1-3mL第六溶剂，滴干溶剂，再加入1-3mL所述第五溶剂，滴干溶剂，收集洗脱液；其中，所述第六溶剂包括但不限于体积比为8:2的正己烷/丙酮混合溶液、或体积比8:2的正己烷/乙酸乙酯混合溶液；

(5)浓缩定容：

将所述步骤(3)中收集得到的溶液与所述步骤(4)中收集的洗脱液两者合并，在氮气保护下吹干，然后用0.05-1mL所述第三溶剂复溶得到浓缩液，接着将所述浓缩液转移至样品瓶中，待上机分析；

(6)对所述步骤(5)得到的样品瓶中的浓缩液进行气相色谱质谱联用仪分析，所述气相色谱质谱联用仪的色谱条件和质谱条件预先经过多反应监测模式检测下的优化处理；所述多反应监测模式检测下的优化处理是根据预先选定的待测目标半挥发性有机物的种类，基于各个待测目标半挥发性有机物的单标准品溶液，通过优化色谱和质谱检测过程中各个待测目标半挥发性有机物的检测灵敏度实现的；

(7)利用所述步骤(6)得到的分析结果，计算所述待检测的血清或血浆样品中各个待测目标半挥发性有机物的浓度；

其中，所述预先选定的待测目标半挥发性有机物为至少2种半挥发性有机物，选自：邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二异丁酯、邻苯二甲酸二正丁酯、邻苯二甲酸丁苄酯、邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯、邻苯二甲酸二正辛酯、PCB-28、PCB-52、PCB-101、PCB-118、PCB-138、PCB-153、PCB-180、萘、苊烯、苊、芴、菲、蒽、荧蒽、芘、苯并(a)蒽、苯并(b)荧蒽、苯并[k]荧蒽、苯并(a)芘、茚并[1,2,3-cd]芘、二苯蒽、苯并(g,h,i)苝、PBDE-28、PBDE-47、PBDE-99、PBDE-100、PBDE-153、敌敌畏、速灭磷、苯胺灵、灭克磷、氟乐灵、甲拌磷、α-六六六、六氯苯、阿特拉津、苯嗪草酮、β-六六六、五氯硝基苯、γ-六六六、戊炔草胺、二嗪农、乙嘧硫磷、δ-六六六、解草酮、乙草胺、甲基毒死蜱、甲基对硫磷、七氯、莠灭净、扑草净、甲基嘧啶磷、杀螟松、马拉硫磷、异丙甲草胺、艾氏剂、草净津、嘧啶磷、异柳磷、杀螟威、稻丰散、喹硫磷、杀扑磷、o,p'-滴滴伊、杀虫畏、多效唑、丁草胺、α-硫丹、苯线磷、敌草胺、丙溴磷、p,p'-滴滴伊、恶草酮、狄氏剂、o,p'-滴滴滴、乙氧氟草醚、除草醚、异狄氏剂、吡氟禾草灵、β-硫丹、乙硫磷、p,p'-滴滴滴、o,p'-滴滴涕、p,p'-滴滴涕、哒嗪硫磷、联苯菊酯、甲氰菊酯、伏杀硫磷、氯氟氰菊酯、氯菊酯、蝇毒磷、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯。

2.如权利要求1所述血液中半挥发性有机物的检测方法，其特征在于，所述预先选定的待测目标半挥发性有机物同时包括邻苯二甲酸酯类、多氯联苯类、多环芳烃类、多溴二苯醚类、农药类中的至少2类半挥发性有机物。