[发明专利]一种用于丝素蛋白检测的免疫传感器修饰电极的制备方法

权利要求书

1.一种用于丝素蛋白检测的免疫传感器修饰电极的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

步骤1：氧化石墨烯的制备：将石墨粉和高锰酸钾分别加入到浓硫酸中，两者混合后超声分散，将其置于水浴中搅拌，再将其加入到水中，加入过氧化氢溶液，随后离心，向离心所得固体混合物加水混合，随后在细胞粉碎仪中超声 离心处理，取上层黑色液体，得到GO悬浮液；

步骤2：含醛基的离子液体的制备：在室温下以恒定搅拌速率将1，8二溴辛烷滴加至乙腈中，随后逐滴滴加4-吡啶甲醛；将混合均匀后所得混合物在惰性环境中搅拌回流反应；反应结束后，收集产物并离心处理，洗涤，干燥后得到含醛基的离子液体；

步骤3：GO-IL复合材料溶液的制备：取GO悬浮液，加入含醛基的离子液体，在细胞粉碎仪中超声处理，随后收集所得混合溶液，得到GO-IL复合材料溶液；

步骤4：金纳米颗粒溶液的制备：量取氯金酸溶液置于容器中，在恒温水浴中边加热边搅拌，随后继续加热至沸腾，逐滴滴加柠檬酸三钠溶液，对容器封口后持续反应，停止加热，冷却至室温，所得溶液为金纳米颗粒溶液；

步骤5：GO-IL修饰电极的制备方法：将玻碳电极置于麂皮上，加入纳米氧化铝和超纯水进行抛光打磨，随后用无水乙醇和去离子水分别超声处理，保证玻碳电极打磨干净；在玻碳电极表面滴加GO-IL复合材料溶液，干燥后得到GO-IL修饰电极；

步骤6：GO-IL@AuNPs修饰电极的制备：在干燥后的GO-IL修饰电极上滴加金纳米颗粒溶液，干燥后即得GO-IL@AuNPs修饰电极，即用于丝素蛋白检测的免疫传感器修饰电极。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1具体为：将石墨粉和高锰酸钾按1:1的质量比称取2-3g，之后分别加入到50-60 mL浓硫酸中，两者混合后超声分散10-20 min，将其置于50-60℃的水浴中搅拌3-5h，再将其加入到350-450 mL的去离子水中，加入35-45mL的25-35wt%过氧化氢溶液，离心处理，将350-450 mL的去离子水加入到离心所得混合物中，在细胞粉碎仪中超声70-90 min，将超声后溶液在3000-5000 rpm转速下离心10-30min，取上层黑色液体即得到GO悬浮液。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2中，1，8二溴辛烷、乙腈和4-吡啶甲醛用量比为（8-10g）:（7-9g）:（45-55mL）。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2中，所述恒定搅拌速率为400-600r/min；反应温度为70-90℃，反应时间为20-30h；反应结束后，离心转速为8000-12000rp。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3中，GO悬浮液与含醛基的离子液体的用量比为（1-2mL）:（20-30mg）。

6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3中，超声时间为2-2.5h。

7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤4中，氯金酸溶液的浓度为0.8-1.2mM，柠檬酸三钠溶液的浓度为0.1-0.12M；氯金酸溶液与柠檬酸三钠溶液的体积比为150:（40-45）。

8.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤4中，恒温水浴温度为95-105℃；反应时间为10-30min，金纳米颗粒制备成功的标志为溶液变为酒红色。

9.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤5中，抛光打磨时间为5-15min，待对电极进行循环伏安法测试后，氧化还原峰的间距小于100 mV，电极表面视为打磨干净；超声处理时间为5-15min；在玻碳电极表面滴加1-5μL的GO-IL复合材料溶液，干燥温度为30-40℃；滴加GO-IL时在圆形反光范围内滴加。

10.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤6中，在干燥后的GO-IL修饰电极上滴加1-5μL的金纳米颗粒溶液，干燥温度为30-40℃。