[发明专利]基于荧光光谱法检测四环素类抗生素的方法

说明书

本发明提供了一种基于荧光光谱法检测四环素类抗生素的方法，包括：混合原料先将纳米Fe₃O₄与四环素类抗生素混合并孵育，然后与罗丹明、双氧水和碘化钾均匀混合，并加入缓冲液调节pH值至3～5，得到原料混合液；形成荧光溶液所述原料混合液在30℃～70℃进行水浴加热反应，形成化学荧光溶液；发光检测及建立回归方程利用荧光光谱仪检测所述化学荧光溶液的荧光强度F，根据检测的所述荧光强度F与所述四环素类抗生素浓度c之间的关系，建立检测四环素类抗生素的回归方程。本发明提供的上述方法具有操作简单方便、较高的灵敏度和良好的准确度，为进一步的分析应用提供了可能。

技术领域

本发明涉及荧光光谱法的定量检测方法，尤其涉及一种基于荧光光谱法检测四环素类抗生素的方法。

背景技术

众所周知，抗生素在人类医学和兽医学中被广泛用作药物和食品添加剂。根据中国食品药品监督管理局的数据，2012年中国的抗生素材料年产量达到210,000吨。抗生素会通过多种途径释放到环境中，环境中残留过量的抗生素会造成环境污染，增加细菌的耐药性。大量使用抗生素还会导致其在日常食物制品中累积，例如肉类，蛋类及奶制品并通过食物链在人身体内积聚，损害人体健康。因此，检测和控制食品中的抗生素非常重要。

当前抗生素的检测方法主要包括色谱法、质谱法、免疫测定法、电化学法和荧光光谱法等。其中，荧光光谱法因其便利，灵敏而被广泛使用。例如，采用经适配体修饰的金纳米颗粒(AuNPs)来检测磺胺二甲嘧啶；利用适配体修饰的银纳米颗粒(AgNPs)检测卡那霉素；使用基于AuNPs、生物素和链霉亲和素的适配体传感器来检测氯霉素，等等。但是，上述这些方法通常需要适配体作为识别单元，这会增加操作的复杂度并限制其应用范围。因此，迫切需要一种简单灵敏的抗生素检测方法。

四环素类抗生素(TCs)是使用最广泛的抗生素之一，主要包括土霉素(OTC)、四环素(TC)和金霉素(CTC)三种抗生素，此外还包括强力霉素(DC)。Huang等人于2019年发表的一篇论文中公开了一种同时从鸡蛋中提取和测定TC、CTC、DC的新方法，该方法采用辐射式多分子印迹固相萃取(MISPE)-PDMS/玻璃阵列芯片涂层磁性氧化石墨烯(Fe₃O₄/GO)(Huang,et al.,Chip-based multi-molecularly imprinted monolithic capillary arraycolumns coated Fe₃O₄/GO for selective extraction and simultaneousdetermination of tetracycline,chlortetracycline and deoxytetracycline ineggs.Microchemical Journal 150(2019)104097.)。Huang等人提供的方法虽然可以从鸡蛋中鉴别四环素类抗生素TC、CTC、DC，但是该方法存在修饰过程繁琐、操作复杂、需要复杂的如HPLC的大型仪器等问题，不利于现场分析。

发明内容

有鉴于此，本发明确有必要提供一种基于荧光光谱法检测四环素类抗生素的方法，以解决上述问题。

进一步，本发明的一个目的是提供一种基于荧光光谱法检测四环素类抗生素的方法，能够实现简单方便地从食品中定量检测OTC、TC和CTC。

具体地，本发明提供一种基于荧光光谱法检测四环素类抗生素的方法，包括：

混合原料先将纳米Fe₃O₄与四环素类抗生素混合并孵育，然后与罗丹明、双氧水和碘化钾均匀混合，并加入缓冲液调节pH值至3-5，得到原料混合液；

形成荧光溶液所述原料混合液在30℃～70℃进行水浴加热反应，形成化学荧光溶液；