[发明专利]基于荧光光谱法检测四环素类抗生素的方法

权利要求书

1.一种基于荧光光谱法检测四环素类抗生素的方法，包括：

混合原料 先将纳米Fe₃O₄与四环素类抗生素混合并孵育，然后与罗丹明、双氧水和碘化钾均匀混合，并加入缓冲液调节pH值至3～5，得到原料混合液，其中，所述四环素类抗生素为OTC、TC、CTC或其任意组合；

形成荧光溶液 所述原料混合液在30℃～70℃进行水浴加热反应，形成化学荧光溶液；

发光检测及建立回归方程 利用荧光光谱仪检测所述化学荧光溶液的荧光强度F，根据检测的所述荧光强度F与所述四环素类抗生素浓度c之间的关系，建立检测四环素类抗生素的回归方程。

2.根据权利要求1所述的基于荧光光谱法检测四环素类抗生素的方法，其特征在于，所述纳米Fe₃O₄的制备方法包括：FeCl₃和NaAc溶于乙二醇中均匀混合，获得混合液；所述混合物在180℃～210℃反应6～9 h，冷却至室温，得到铁氧化物混合物；采用外加磁体从所述铁氧化物混合物中收集黑色产物；对所述黑色产物进行洗涤和干燥处理，即获得所述纳米Fe₃O₄。

3.根据权利要求1或2所述的基于荧光光谱法检测四环素类抗生素的方法，其特征在于，所述混合原料的步骤包括：将10 μL 0.2～1.0 mg/mL的纳米Fe₃O₄和10μL的四环素类抗生素加入1.5 mL的离心管中孵育4～9 min，然后将10 μL 0.2～1.2 mM的Rh6G、10 μL 10～120 mM的H₂O₂、10μL 350～550 mM的KI加入所述离心管中，并用HAc-NaAc缓冲液稀释至1mL，得到所述原料混合液。

4.根据权利要求3所述的基于荧光光谱法检测四环素类抗生素的方法，其特征在于，所述形成荧光溶液的步骤包括：将所述原料混合液混合均匀，并在30℃～70℃水浴加热20～60 min，形成所述化学荧光溶液。

5.根据权利要求4所述的基于荧光光谱法检测四环素类抗生素的方法，其特征在于，所述发光检测及建立回归方程的步骤包括：将所述荧光光谱仪的狭缝宽度定为0.5 nm，并检测所述化学荧光溶液于530～600 nm处的荧光强度F，根据检测的所述荧光强度F与所述四环素类抗生素浓度c之间的关系，建立检测四环素类抗生素的回归方程。

6.根据权利要求5所述的基于荧光光谱法检测四环素类抗生素的方法，其特征在于，当所述四环素类抗生素为浓度40～2400 nM的OTC时，建立的回归方程为F=9.40049-0.00308×c，其中，相关系数R² = 0.99672，检测下限为20 nM。

7.根据权利要求5所述的基于荧光光谱法检测四环素类抗生素的方法，其特征在于，当所述四环素类抗生素为浓度30～1800 nM的TC时，建立的回归方程为F=9.26289-0.00422×c，其中，相关系数R² = 0.99244，检测下限为10 nM。

8.根据权利要求5所述的基于荧光光谱法检测四环素类抗生素的方法，其特征在于，当所述四环素类抗生素为浓度50～1500 nM的CTC时，建立的回归方程为F=9.91375-0.00555×c，其中，相关系数R² = 0.99453，检测下限为40 nM。