[发明专利]一种制备舍莫瑞林的方法

说明书

本发明公开了一种制备舍莫瑞林的方法，首先采用固相合成方法在固相树脂载体上并有缩合试剂的条件下由碳端向氮端逐一偶联保护氨基酸，合成得到9肽片段和20肽片段树脂，然后根据肽链顺序固相片段缩合得到29肽树脂，根据29肽树脂中R保护基特性选择R保护基的脱除与树脂裂解的同步或先后顺序，进行R保护基的脱除与树脂裂解最终得到舍莫瑞林粗肽，再经制备液相纯化、冻干得到高纯度舍莫瑞林。本发明方法大大缩短了合成周期，通过特殊氨基酸的应用，降低了片段缩合中消旋杂质，也避免了传统固相逐一偶联效率低的方法，也避开了步骤复杂、繁琐的液相方法，大大降低成本，其纯度高，副产物少，有利于产品的纯化，产物收率高，便于大生产化操作。

技术领域

本发明属于多肽类药物制备技术领域，具体涉及一种制备舍莫瑞林的方法。

背景技术

舍莫瑞林(Sermorelin)是人工合成的由29个氨基酸组成的生长激素释放素,为内源性促生长激素释放激素(GHRH)的氨基末端片段,具有显著的调节生长的效应，分子量3357.882Da，分子式C₁₄₉H₂₄₆N₄₄O₄₂S，其肽序如下：Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-NH₂。

目前舍莫瑞林的化学合成方法有以下几种：(1)采用BOC做为氨基保护基，通过固相逐一偶联成29全肽树脂，如WO2005016953A2、US4703035；其缺点明显，在合成过程中去树脂要用到HF，操作危险性大，每一步都要用TFA脱保护，偶联效率低、合成强度大，对设备、环境要求较高；(2)采用液相片段7+7+5+10、6+4+4+4+4+7得到全肽，分别如US4774319A、JPS61115098A；其缺陷在于，液相反应合成中长肽链，每一步需要监控和后处理，实验过程繁琐，不利于车间化生产。

为了克服舍莫瑞林固相逐一偶联过程中遇到偶联困难、疏水性强且偶联效率低、周期长等缺陷，本发明希望提供一种新的制备舍莫瑞林的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种制备舍莫瑞林的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种制备舍莫瑞林的方法：一个9肽片段与一个20肽片段树脂固相缩合得到29肽树脂，将该29肽树脂经裂解反应获得舍莫瑞林粗品，再提纯后获得舍莫瑞林纯品；

所述9肽片段为A1或A2，所述20肽片段树脂为B1或B2，所述29肽树脂为A1-B1、A1-B2、A2-B1或A2-B2。

其中：

A1:R-Tyr(tBu)-Ala-Asp(OtBu)-Ala-Ile-Phe-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ser(Ψ(Me,Me)Pro)-OH；

A2:R-Tyr(tBu)-Ala-Asp(OtBu)-Ala-Ile-Phe-Thr(tBu)-Asn(Trt)-(Hmb)Ser(tBu)-OH；

B1:Tyr(tBu)-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Val-Leu-Gly-Gln(Trt)-Leu-Ser(Ψ(Me,Me)Pro)-Ala-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Leu-Leu-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Ile-Met-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-树脂；

B2:Tyr(tBu)-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Val-Leu-Gly-Gln(Trt)-Leu-(Hmb)Ser(tBu)-Ala-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Leu-Leu-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Ile-Met-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-树脂；