[发明专利]一种用于单增李斯特菌荧光RAA检测的引物和探针序列及其应用在审

专利信息
申请号: 202011152224.6 申请日: 2020-10-24
公开(公告)号: CN112458189A 公开(公告)日: 2021-03-09
发明(设计)人: 周冬根;罗洁;应清界;俞雪钧 申请(专利权)人: 宁波国际旅行卫生保健中心(宁波海关口岸门诊部)
主分类号: C12Q1/689 分类号: C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01
代理公司: 北京知汇林知识产权代理事务所(普通合伙) 11794 代理人: 董涛
地址: 315012 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 用于 李斯特 荧光 raa 检测 引物 探针 序列 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种用于单增李斯特菌荧光RAA检测的引物和探针序列,其特征在于:根据单增李斯特菌的特异保守区域为靶标区域设计特异性引物及荧光RAA探针,引物序列具体如下:

正向引物为5'-ACCAGCTGTAACTTTTTCGGTTCAAGCTATG-3';

反向引物为5'-GTGTGGTTAAATCCAATTGCATGATAATCT-3';

寡核苷酸探针:5'-AAGCCACCCATTATCATTGACCCAGTCACT/FAM-dT/C/THF/AC/BHQ-dT/AAGGATTTCCAACTT-3';其中:FAM:6-羧基荧光素;THF:四氢呋喃;BHQ:黑洞淬灭剂;phosphate:3’进行磷酸化以中止延伸。

2.一种根据权利要求1所述的用于单增李斯特菌荧光RAA检测的引物和探针序列在制备单增李斯特菌荧光RAA检测试剂盒中的应用。

3.一种用于单增李斯特菌荧光RAA检测的,其特征在于:包括RAA基础荧光通用反应试剂、反应缓冲液、阴性质控品和阳性质控品,还包括有权利要求1所述的引物对和探针。

4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于:RAA反应体系如下:RAA反应缓冲液25μl;10μM的正向引物2.1μl、10μM的反向引物2.1μl;10μM的探针0.6μl;DNA模板2μl;加15.5μl双蒸水至47.5μl,混合均匀,然后加入到有干粉的反应管中,再次混匀,最后各管加入2.5μl280mM醋酸镁溶液并混匀。

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