[发明专利]β-烟酰胺单核苷酸的分析方法在审
| 申请号： | 202011150164.4 | 申请日： | 2020-10-23 |
| 公开（公告）号： | CN114487218A | 公开（公告）日： | 2022-05-13 |
| 发明（设计）人： | 卢蕾;李巧峰;张国燕;蒋露;吕久安;童卫民 | 申请（专利权）人： | 北京红惠新医药科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/06 | 分类号： | G01N30/06;G01N30/74 |
| 代理公司： | 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 | 代理人： | 梁文惠 |
| 地址： | 102609 北京市大兴*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 烟酰胺单 核苷酸 分析 方法 | ||
1.一种β-烟酰胺单核苷酸的分析方法，其特征在于，所述分析方法包括对含β-烟酰胺单核苷酸的待测试物进行HPLC分析，其中所述HPLC分析的色谱柱为Waters XBridge BEHAmide色谱柱，流动相包括乙腈和缓冲溶液，所述缓冲溶液的pH值为3.0～10.0。
2.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述乙腈和所述缓冲溶液的体积比为50～86：14～50，优选所述缓冲溶液选自甲酸铵缓冲溶液、乙酸铵缓冲溶液、甲酸缓冲溶液、乙酸缓冲溶液中的任意一种或多种。
3.根据权利要求1或2所述的分析方法，其特征在于，所述HPLC分析的过程包括：
将所述含β-烟酰胺单核苷酸的待测试物在色谱柱中进行梯度洗脱，所述梯度洗脱依次包括第一梯度洗脱、第二梯度洗脱和第三梯度洗脱，
其中，所述第一梯度洗脱采用的第一流动相包括体积比为1:4～1:6的所述缓冲溶液与所述乙腈，所述第二梯度洗脱采用的第二流动相包括体积比为1:1～1:2的所述缓冲溶液与所述乙腈，所述第三梯度洗脱采用的第三流动相包括体积比为1:4～1:6的所述缓冲溶液与所述乙腈，优选所述第一梯度洗脱的时间为5～10min，优选所述第二梯度洗脱的时间为40～55min，优选所述第三梯度洗脱的时间为100～150min。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的分析方法，其特征在于，所述缓冲溶液的pH值为8.0～10.0，优选为9.0。
5.根据权利要求1至3中任一项所述的分析方法，其特征在于，所述HPLC分析的检测波长为254～270nm，优选为265nm。
6.根据权利要求1至3中任一项所述的分析方法，其特征在于，所述Waters XBridgeBEH Amide色谱柱的填料粒度为3～5μm，优选为5μm，优选所述Waters XBridge BEH Amide色谱柱的柱长为250mm，优选所述Waters XBridge BEH Amide色谱柱的柱内径为4.6mm。
7.根据权利要求1至3中任一项所述的分析方法，其特征在于，所述Waters XBridgeBEH Amide色谱柱的进样量为15～25μL，优选为20μL。
8.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述流动相流速为0.8～1.2mL/min。
9.根据权利要求1至3中任一项所述的分析方法，其特征在于，所述Waters XBridgeBEH Amide色谱柱的柱温为20～40℃，优选为25℃。
10.根据权利要求1至3中任一项所述的分析方法，其特征在于，所述含β-烟酰胺单核苷酸的待测试物包括β-烟酰胺单核苷酸、烟酰胺以及烟酰胺核糖。
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