[发明专利]一种检测草本牡丹挥发性物质的方法

说明书

本发明涉及活体植株挥发性物质采集及分析技术领域，具体涉及一种检测草本牡丹挥发性物质的方法。包括步骤：采集草本牡丹挥发性物质，ATD‑GC/MS分析，具体的，分析包括：热脱附进样、色谱分离和质谱检测，所得总离子流(TIC)图中各有效峰经TurboMass软件检索牡丹挥发性物质比对标准谱库NIST08，再结合保留时间、正反匹配度大于800、相关化学经验明确成分，草本牡丹挥发性物质化合物的相对百分含量采用面积归一化法计算。该方法具有具有连续、高效、原位、天然、低碳的特点。

技术领域

本发明涉及活体植株挥发性物质采集及分析技术领域，具体涉及一种检测草本牡丹挥发性物质的方法。

背景技术

草本牡丹花挥发性物质是草本牡丹花枝释放的具有香味的次生代谢物质，由分子量较小的化合物组成，可以被吸附剂Tenax-GR所吸附，是具有一定气味的挥发性的气体物质的总称。

目前，植物花挥发性物质成分主要包括醇、醛、酮、有机酸、酯、萜烯化合物、较复杂的含氮化合物和烃类化合物。植物挥发性物质等次生代谢物质的采集与分析方法包括正己烷萃取液-GC/MS、水蒸汽蒸馏产物-GC/MS、顶空固相微萃取和气相色谱-质谱联用法、活体植株动态顶空罩袋采集法与TCT-GC/MS、活体动态顶空罩袋-吸附采集法。

但是上述技术存在以下缺陷：己烷萃取液-GC/MS、水蒸汽蒸馏产物-GC/MS提取挥发物纯度低、有化学变化，顶空固相微萃取和气相色谱-质谱联用法一般为室内实验，活体动态顶空罩袋吸附采集法分析的挥发性物质种类和含量低。

发明内容

基于上述技术问题，有必要提供一种纯度高、无化学变化、原位、连续、活体有效采样，不损害草本牡丹天然生长的挥发性物质采集和检测方法。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种草本牡丹挥发性物质的检测方法，包括如下步骤：

S1、用不锈钢采样管采集草本牡丹挥发性物质，并保存；

S2、ATD-GC/MS分析，依次包括热脱附进样，色谱分离和质谱检测，得到挥发性物质的总离子流图；

热脱附进样仪器条件如下：

仪器：TurboMatrix 50全自动热脱附仪(ATD)；

载气(横流模式)流速：2.0ml/min；

一级热脱附温度(样品管温度)：260-265℃，加热10min；

一级热脱附过程中冷阱温度：-30℃；

一级至二级热脱附过程中冷阱升温速度：40℃/s；

二级热脱附温度：295-300℃，保持5min；

热脱附方式：进口分流，一般吹干，时间1min；

脱附流量：25.00ml/min；

入口分流流量10.00ml/min；出口分流流量20.00ml/min；

S3、S2分析所得总离子流(TIC)图中各有效峰经TurboMass软件检索牡丹挥发性物质比对标准谱库NIST08，再结合保留时间、正反匹配度大于800、相关化学经验明确成分，草本牡丹挥发性物质化合物的相对百分含量采用面积归一化法计算。

进一步的，色谱分离与质谱检测采用Clarus 600气相色谱/Clarus 600T质谱联用仪；仪器条件如下：

色谱分离：

色谱柱：Elite-5 MS毛细管柱(30m×0.32mm，0.252um)；