[发明专利]一种波氏杆菌外膜囊泡的制备方法及应用有效
| 申请号： | 202011139649.3 | 申请日： | 2020-10-22 |
| 公开（公告）号： | CN112342156B | 公开（公告）日： | 2022-08-12 |
| 发明（设计）人： | 黄叶娥;南黎;肖琛闻;刘燕;鲍国连;季权安;韦强 | 申请（专利权）人： | 浙江省农业科学院 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;A61K39/10;A61P31/04;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京知呱呱知识产权代理有限公司 11577 | 代理人： | 康震 |
| 地址： | 310021 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 杆菌 外膜囊泡 制备 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种波氏杆菌外膜囊泡的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)培养波氏杆菌菌液：将波氏杆菌菌株划线接种于TSA平板，37℃培养36h，挑取单菌落接种于TSB培养基中，37℃、200rpm摇床上培养10h后，按1:100在含有头孢氨苄的TSB培养基中扩大培养；
2)将步骤1)培养获得的菌液，在10000g，20min，4℃条件下离心，取上清，滤器过滤；
3)步骤2)获得的滤液使用分子量为100kDa的超滤管在5000g，20min，4℃条件下浓缩，所得浓缩液在100000g，4℃条件下超速离心2h，弃上清，沉淀用TE Buffer重悬，于-80℃冻存；步骤1)中，所述含有头孢氨苄的TSB培养基中的头孢氨苄浓度为64μg/mL；步骤1)中，扩大培养18h；步骤2)中，所述滤器孔径为0.45μm。
2.权利要求1所述方法制得的波氏杆菌外膜囊泡在制备波氏杆菌疫苗中的应用。
3.一种波氏杆菌疫苗，包括权利要求1所述方法制得的波氏杆菌外膜囊泡和佐剂。
4.根据权利要求3所述的波氏杆菌疫苗，其特征在于，所述佐剂为铝佐剂。
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