[发明专利]一种遗传性配子发生障碍的致病突变及其检测试剂

说明书

本发明公开了一种遗传性配子发生障碍的致病突变及其检测试剂。一种突变的Pof1b基因，突变的Pof1b基因位于X号染色体，为缺失突变c.312_316delp.S104fs，野生型Pof1b基因在Ensemble数据库中的基因编号为:ENSG00000124429，所述的缺失突变的Pof1b基因所在物理位置为第三个外显子，chrX‑84622737‑84622742位碱基缺失五个碱基TACAT，后续序列造成移码突变。突变的Pof1b基因或所述的突变的POF1B蛋白作为检测靶点在制备男性非梗阻性无精症或女性遗传性原发性卵巢功能不全辅助诊断试剂或检测设备中应用。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及一种遗传性雌雄配子发生障碍的致病突变及其检测试剂。

背景技术

原发性卵巢功能不全(primary ovarian insufficiency，POI)是指女性40岁以前闭经，并伴有促性腺素水平升高和雌激素水平降低，以及一定程度的一系列低雌激素引起的围绝经期症状如潮热多汗、面部潮红、性欲低下、情绪改变等，约1-2％的育龄妇女患有此病。根据疾病发生发展进程，原发性卵巢功能不全分为隐匿期、生化异常期和临床衰竭期三个发展阶段，卵巢早衰(premature ovarian failure，POF)是其终末阶段。POF意味着能发育及排卵的卵子极少，且目前仍然无有效手段恢复或改善卵巢功能，严重影响病患的心理状态及生活质量，给患者带来极大的身体和精神痛苦，其社会适应性明显降低。

对于三次或三次以上精液离心后镜检未发现精子，同时排除不射精和逆行射精等因素即可诊断为无精子症。男性不育无精子症可分为梗阻性无精子(OA)、非梗阻性无精子症(NOA)、混合型无精子症(Combined azoospermia)3类。非梗阻性无精子症(Nonobstructive azoospermia，NOA)作为预后较差的男性不育发病类型，一直是男性不育领域研究的热点和重要方向。

因此，寻找潜在的能够辅助原发性卵巢功能不全及非梗阻性无精子症临床诊断的其他早期诊断方式显得尤为重要。

POI的遗传学病因研究结果表明，遗传物质的异常既可发生在染色体水平，也可发生在单个基因水平，目前已发现几十种基因通过各种致病途径和发病机制干扰卵巢功能。然而这些基因的突变并不能够解释全部POI患者的遗传病因，仍有大量POI患者的致病基因尚未找到，提示存在未知的POI的新致病基因有待挖掘。针对POI的分子遗传学研究必须建立在一定的分子生物学技术的基础上。研究POI致病基因的一个重要目的是进行POI的分子诊断，鉴于其遗传异质性，寻求一种全新的POI致病基因的研究方法显得尤为迫切。

原发性睾丸衰竭引起的精子发生数量障碍约占男性因素不育病例的75％，是最常见的精子发生障碍病因，某些遗传因素与生殖功能受损有着明显的因果关系，对这些因素的检测能够为20％的男性不育病例提供遗传诊断。无精子症患者遗传异常的风险最高可达到25％，并且这一风险伴随着精子产量的增加而逐渐降低。遗传因素主要包括：染色体异常、卡尔曼综合征、轻度雄激素不敏感综合征、Y染色体微缺失、特发性男性不育等。

高通量二代测序技术能够高效的针对大量基因的遗传信息进行捕获，具有传统技术所不可及的优势。

Pof1b(premature ovarian failure 1B)基因(NC_000023.11)位于X染色体长臂Xq21.1位置，该基因含有17个外显子，其编码的POF1B蛋白含有589个氨基酸，目前研究有报道Pof1b基因突变能够引起卵巢早衰，但其与原发性卵巢功能不全及非梗阻性无精子症间的关系国内外均未见报道。

遗传性原发性卵巢功能不全或非梗阻性无精子症是常见的、严重的遗传性生殖障碍，严重危害了国民健康。挖掘其新致病突变和新致病基因有利于进一步探索遗传性原发性卵巢功能不全或无精子症的分子遗传学病因，是分利用我国的生殖遗传病资源，造福不孕不育患者的现实需要，是后基因组时代最重要的研究方向之一。本专利旨在探索遗传性原发性卵巢功能不全或非梗阻性无精子症的遗传学病因，从而帮助了解发病机制、辅助临床诊断、产前诊断和转基因治疗。