[发明专利]一种快速筛选高产聚谷氨酸菌株的方法有效
| 申请号: | 202011119018.5 | 申请日: | 2020-10-19 |
| 公开(公告)号: | CN112251356B | 公开(公告)日: | 2022-10-11 |
| 发明(设计)人: | 冯劲;施庆珊;谢小保;王玲玲;崔银花;周刚;梁彩珍 | 申请(专利权)人: | 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) |
| 主分类号: | C12N1/02 | 分类号: | C12N1/02;C12N1/20;C12Q1/04;C12R1/125;C12R1/10 |
| 代理公司: | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人: | 朱双;刘明星 |
| 地址: | 510070 广东省广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 快速 筛选 高产 谷氨酸 菌株 方法 | ||
1.一种快速筛选高产聚谷氨酸菌株的方法,其特征在于,包括以下步骤:
a.将待筛选样品梯度稀释后涂布于分离培养基上培养;
b.根据待筛选样品中菌种/菌群类型,配制相应的半固体发酵培养基,灭菌后将融化的培养基分装入无菌的培养孔板中,将分离培养基上单菌落转接到孔中的凝结后的半固体发酵培养基上,盖好孔板盖,将孔板倒置放入相对湿度维持80%以上的培养箱中培养;观察孔板盖是否有液体状产物,如有,则接入该孔的菌株为高产聚谷氨酸菌株;
当待筛选样品中菌种/菌群为地衣芽孢杆菌,其半固体发酵培养基为:含有柠檬酸12g/L、甘油80g/L、L-谷氨酸20g/L、氯化铵7g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、七水硫酸镁0.5g/L、二水氯化钙0.15g/L、一水硫酸锰0.104g/L、六水氯化铁0.01g/L和琼脂2g/L,余量为水,pH6.5;
当待筛选样品为纳豆,其半固体发酵培养基为:含有大豆粉40g/L和琼脂8g/L,余量为水,pH6.5;
当待筛选样品中菌种/菌群为枯草芽孢菌,其半固体发酵培养基为:含有葡萄糖60g/L、蛋白胨20g/L、磷酸氢二钾1.5g/L、七水硫酸镁0.05g/L、二水氯化钙0.1g/L、一水硫酸锰0.104g/L、六水氯化铁0.01g/L和琼脂5g/L,余量为水,pH6.5;
当待筛选样品为盐碱地土样,其半固体发酵培养基为:含有葡萄糖100g/L、蛋白胨50g/L、谷氨酸钠100g/L、磷酸氢二钾2g/L、七水硫酸镁0.05g/L和琼脂3g/L,余量为水,pH6.5;
所述的步骤b的将孔板倒置放入相对湿度维持80%以上的培养箱中培养,是在37℃培养24-96h。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的培养基分装,其分装量控制为培养基液面离盖好后的孔板盖的距离为2-15mm。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的培养孔板为96孔、48孔、24孔或12孔培养板,所述的分离培养基为营养琼脂培养基。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤a的涂布于分离培养基上培养,是在37℃培养24h。
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