[发明专利]一种用于治疗口腔溃疡的骨髓间充质干细胞组合物及其制备方法

权利要求书

1.一种用于治疗口腔溃疡的骨髓间充质干细胞组合物，其特征在于，包括以下重量份的原料：骨髓间充质干细胞培养产物3-5份，葡萄柚提取物1.5-2.5份、凝胶基质10-15份、纯化水50-60份；

所述骨髓间充质干细胞培养产物的制备过程如下：

(1)分离人骨髓间充质干细胞：向骨髓中加入肝素抗凝，用PBS稀释后加入淋巴细胞分离液，离心后取中间白膜层，用PBS洗涤后进行细胞计数；

(2)将步骤(1)分离得到的细胞接种于基础培养基中进行原代培养，每2-3天更换培养基，至细胞融合度达到85％-90％，所述基础培养基为低糖DMEM培养基，所述低糖DMEM培养基中包含添加剂、体积分数5％的胎牛血清，所述添加剂的组成为：重组人胰岛素15-20mg/mL、乳酸锌1-5mg/mL、L-茶氨酸45-50μg/mL、聚乙烯吡咯烷酮10-15mg/mL；

(3)取步骤(2)融合度达到85％-90％的细胞经胰酶消化后收集细胞，PBS清洗，对细胞进行匀浆处理，离心取上清液，将上清液经透析袋透析，取透析袋内的溶液冻干，即得骨髓间充质干细胞培养产物。

2.根据权利要求1所述用于治疗口腔溃疡的骨髓间充质干细胞组合物，其特征在于，所述凝胶基质为聚乙烯醇。

3.根据权利要求1所述用于治疗口腔溃疡的骨髓间充质干细胞组合物，其特征在于，步骤(2)中细胞接种浓度为1-2×10⁴个/mL。

4.根据权利要求1所述用于治疗口腔溃疡的骨髓间充质干细胞组合物，其特征在于，步骤(2)中在37℃、5％CO₂的条件下进行原代培养。。

5.根据权利要求1所述用于治疗口腔溃疡的骨髓间充质干细胞组合物，其特征在于，所述透析袋的截留分子量为12KD-14KD。

6.如权利要求1至5所述用于治疗口腔溃疡的骨髓间充质干细胞组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：取凝胶基质溶解于纯化水中，加入骨髓间充质干细胞培养产物和芦荟提取物，混合均匀，辐照处理即得产品。