[发明专利]一种从海参中提取岩藻聚糖硫酸硫酸酯和硫酸软骨素的方法

权利要求书

1.一种从海参中提取岩藻聚糖硫酸硫酸酯和硫酸软骨素的方法，其特征在于，所述的方法包括如下的步骤：

1)海参预处理：

将海参进行组织破碎后加入蒸馏水进行浸提，浸提结束后进行离心，取沉淀待用；其中海参与水的质量比为1:5-1:10，蒸馏水进行浸提是在30-50℃搅拌浸提30-60min；

2)水溶液提取和分离：

将步骤1)离心获得的沉淀中加入Tris-HCl水溶液进行提取，提取结束后离心，收集提取液和沉淀；

所述的Tris-HCl水溶液的浓度为0.1-0.3mol/L，pH 8.0，含有4mmol/L EDTA；

所述的提取，是在30-50℃缓慢搅拌提取12-24h；

3)将步骤2)获得的提取液真空浓缩后，加入氯化十六烷基吡啶进行沉淀，离心收集沉淀；沉淀溶解于添加了NaCl的醇溶液中；然后用90％乙醇水溶液进行沉淀、冷冻干燥后得海参岩藻聚糖硫酸酯干品；

4)将步骤2)中获得的沉淀加入复合蛋白酶，在45-60℃水浴中酶解3-5h；

5)将步骤4)的酶解液离心，收集上清液；上清液真空浓缩后，采用超滤膜超滤脱蛋白脱盐，收集截留液；截留液经真空浓缩、干燥后，得到岩藻糖基硫酸软骨素干品。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的3)中添加了NaCl的醇溶液，是添加了3mol/L氯化钠的86％乙醇溶液。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的3)中用于沉淀的乙醇水溶液，是90％乙醇水溶液。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的4)中所述的复合蛋白酶为碱性蛋白酶和胰蛋白酶混合物。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的5)中所述超滤膜是截留分子量为5kDa-20kDa的超滤膜。