[发明专利]一种测定生物样品中芬太尼类药物的方法及试剂盒

权利要求书

1.一种测定生物样品中芬太尼类药物的方法，其特征在于，采用HPLC-MS/MS测定生物样品中芬太尼类药物含量，具体包括以下步骤：

(1)样品预处理：取样品加入2倍样品体积的乙腈振荡提取5min，在离心力15000g下离心10min，离心后通过芬太尼类药物净化萃取管去除提取液中的共萃取杂质；

(2)HPLC-MS/MS检测：液相色谱采用流动相A：0.1％甲酸-水溶液和流动相B：0.1％甲酸-乙腈作为流动相，色谱柱采用Waters BEH C18色谱柱，洗脱方式为梯度洗脱，梯度洗脱条件如下：

；

质谱采用电喷雾离子源正离子多反应监测模式检测；

所述芬太尼类药物具体为：乙酰芬太尼、异丁酰芬太尼、丙烯酰芬太尼、奥芬太尼、芬太尼、戊酰芬太尼和呋喃芬太尼；

步骤(1)所述净化萃取管由混合净化剂、固相萃取柱、筛板、针筒推杆及滤膜组成，净化萃取管使用时，将固相萃取柱底端伸入样品提取液液面以下，同时将推杆缓慢向上拉伸，取样结束后继续向上拉伸推杆，使部分空气进入净化管中，随后将滤膜安装在固相萃取柱底端同时将推杆向下压，在弃去前3-4滴液体后收集剩余滤液；

所述混合净化剂各组分及用量为27mg C18吸附剂、29mg EMR、143mg NH₂、100mg PSA、100mg碱性硅藻土以及100mg碱性氧化铝。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述样品包括全血、唾液和尿液样品。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述混合净化剂各组分及用量的确定方式是采用化学计量学技术进行确定，所述技术具体包括Plackett-Burman筛选试验及响应面-中心组合设计。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述滤膜是0.22μm亲水性PTFE微孔滤膜。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述液相色谱色谱条件：流速：300μL/min；进样量：10μL；

所述质谱条件为：基于电喷雾离子源正离子多反应监测模式；定量检测方式：多反应监测模式；气帘气压力：20psi；碰撞气压力：7psi；去簇电压：120V；离子源电压：4.5kV；离子源温度：500℃。

6.一种应用权利要求1-5任一项所述的方法测定生物样品中芬太尼类药物的试剂盒，其特征在于，包括净化萃取管、标准溶液、0.1％甲酸水溶液、预装乙腈的离心管、质控品以及配套的一次性耗材；

所述净化萃取管由混合净化剂、固相萃取柱、筛板、针筒推杆及滤膜组成；

所述混合净化剂各组分及用量为27mg C18吸附剂、29mg EMR、143mg NH₂、100mg PSA、100mg碱性硅藻土以及100mg碱性氧化铝；

所述标准溶液中的标准物质为乙酰芬太尼、异丁酰芬太尼、丙烯酰芬太尼、奥芬太尼、芬太尼、戊酰芬太尼和呋喃芬太尼。