[发明专利]毕赤酵母定点DSB系统及应用有效
| 申请号： | 202011102551.0 | 申请日： | 2020-10-15 |
| 公开（公告）号： | CN112626102B | 公开（公告）日： | 2023-01-20 |
| 发明（设计）人： | 周飒;马文建;李心雨;陈洪冉;晋利君;向婉晨 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学;齐鲁理工学院 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N15/10;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京盛广信合知识产权代理有限公司 16117 | 代理人： | 张军艳 |
| 地址： | 300457 天津市滨*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 酵母 定点 dsb 系统 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种毕赤酵母定点DSB系统，其特征在于：构建步骤如下：
构建site-I-SceI-KanMX转化盒，利用诱导型启动子，电转化野生毕赤酵母GS115菌株，即得毕赤酵母定点DSB系统；所述诱导型启动子为醇氧化酶AOX基因启动子、半乳糖GAL启动子或四环素TetR启动子；当诱导I-SceI酶表达时，识别特异性位点site进行酶切反应，发生定点DSB，此时，细胞发生修复应答，DNA重组修复效率提高，从而使外源基因整合效率提高，同时，细胞在对损伤修复应答时发生了染色体异倍性现象，并稳定存在且可遗传。
2.根据权利要求1所述的毕赤酵母定点DSB系统，其特征在于：构建site-I-SceI-KanMX转化盒时，I-SceI酶识别位点site序列为：SEQ ID NO.1。
3.如权利要求1或2所述的毕赤酵母定点DSB系统在作为研究定点DSB导致细胞DNA损伤的模型方面中的应用。
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