[发明专利]一种免培养快速检测酱油产气菌的方法有效
| 申请号： | 202011102288.5 | 申请日： | 2020-10-15 |
| 公开（公告）号： | CN112176023B | 公开（公告）日： | 2023-09-08 |
| 发明（设计）人： | 郭建;樊君;罗雯;伍学明;康雪梅 | 申请（专利权）人： | 千禾味业食品股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/06 | 分类号： | C12Q1/06;C12Q1/6851;C12R1/225 |
| 代理公司： | 成都行之专利代理有限公司 51220 | 代理人： | 史丽红 |
| 地址： | 620010 *** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 培养 快速 检测 酱油 产气菌 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种免培养快速检测酱油产气菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、采集胀气酱油的样品；
S2、对胀气酱油的样品进行高通量测序分析，测定胀气样品的微生物组成；
S3、对胀气样本和正常酱油样品进行PCA分析，找出胀气样品的产气关键菌；
S4、根据产气关键菌的16S基因序列，设计专一性引物；
S5、采用染色剂-荧光定量PCR对待检测样品进行鉴定，确定待检测样品的Ct值，DNA染料采用EMA、PMA或PMAxx；
S6、Ct值超过m，待测样品判为合格，Ct值低于m，待测样品判为不合格；
其中，m值的计算方式如下：向无菌酱油中分别加入不同体积份数的胀气酱油，对接种后的混合酱油进行染色剂-荧光定量PCR，获得各样品的Ct值，而后将样品放置30~37℃培养6~12个月，出现胀气的样品中接种胀气酱油量最低的样品Ct值记为m。
2.根据权利要求1所述的一种免培养快速检测酱油产气菌的方法，其特征在于，步骤S4中所述专一性引物是指根据高通量测序出来产气关键菌的16S序列，设计该产气关键菌的特征性引物。
3.根据权利要求1所述的一种免培养快速检测酱油产气菌的方法，其特征在于，步骤S5中，DNA染料加入的终浓度为10~50μg/mL。
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