[发明专利]一种海参活性肽高效仿生制备方法有效
| 申请号: | 202011073789.5 | 申请日: | 2020-10-09 |
| 公开(公告)号: | CN112176015B | 公开(公告)日: | 2022-04-15 |
| 发明(设计)人: | 张轩铭;张姗姗;李晓彬;王利振;何秋霞;侯海荣;李培海;张梦启;王雪;张云;刘可春 | 申请(专利权)人: | 山东省科学院生物研究所 |
| 主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/34;A23L33/18;A61K38/01;A61P39/06;A61P37/04;A61P1/16;A61P9/12 |
| 代理公司: | 济南竹森知识产权代理事务所(普通合伙) 37270 | 代理人: | 朱家富 |
| 地址: | 250103 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 海参 活性 高效 仿生 制备 方法 | ||
1.一种海参活性肽,其特征在于,所述海参活性肽纯度按质量分数计不低于90%,所述活性肽中分子量在1kD以下的含量按质量分数计不低于80%;
所述海参活性肽采用高效仿生方法制备,所述方法包括如下步骤:
(1)干海参粉碎后,按质量体积比g/mL为1:(3~10)加入模拟胃液充分浸透,于36~38.5℃ 振摇消化0.5 ~ 4 h,加入碱中和终止反应,减压蒸干即得海参胃液消化样品;
(2)取海参胃液消化样品,按质量体积比g/mL为1:(3~10)加入模拟肠液充分浸透,于36~38.5 ℃ 振摇消化0.5 ~ 4 h,减压蒸干即得海参肠液消化样品;
(3)取海参肠液消化样品,加入50 % ~75 %的乙醇溶液提取1 ~ 3 h,提取液在4000 ~6000 rpm/min条件下离心10 ~ 20 min,上清液经滤膜超滤、冷冻干燥即得高纯度海参活性肽;
步骤(1)中,模拟胃液包括胃电解质溶液和胃蛋白酶;胃电解质溶液组成为0.03 ~0.08 mol/L NaCl,0.03 ~ 0.08 mol/L NaCl、0.005 ~ 0.03 mol/L KCl或0.03 ~ 0.08mol/L NaCl、0.001 ~ 0.005 mol/L CaCl2;胃蛋白酶和胃电解质溶液配比按质量体积比mg/mL为1:(4.5~12);
步骤(2)中,模拟肠液包括肠电解质溶液和胰蛋白酶;肠电解质溶液组成为0.06 ~0.12 mol/L NaCl,0.06 ~ 0.12 mol/L NaCl、0.004 ~ 0.01 mol/L KCl或0.06 ~ 0.12mol/L NaCl、0.002 ~ 0.008 mol/L CaCl2;胰蛋白酶和肠电解质溶液配比按质量体积比mg/mL为1:(8 ~ 20)。
2.如权利要求1所述的海参活性肽,其特征在于,步骤(1)中,胃电解质溶液组成为0.03~ 0.08 mol/L NaCl、0.005 ~ 0.03 mol/L KCl,胃蛋白酶和胃电解质溶液配比按质量体积比mg/mL为1:(6~10)。
3.如权利要求2所述的海参活性肽,其特征在于,步骤(1)中,胃电解质溶液组成为0.05mol/L NaCl、0.01 mol/L KCl,胃蛋白酶和胃电解质溶液配比按质量体积比mg/mL为1:8.5。
4.如权利要求1所述的海参活性肽,其特征在于,步骤(1)中,模拟胃液用1mol/L HCl调pH值至1.2~2.2。
5.如权利要求1所述的海参活性肽,其特征在于,步骤(1)中,碱中和终止反应使用0.5~ 1 mol/L NaHCO3或Na2CO3。
6.如权利要求1所述的海参活性肽,其特征在于,步骤(2)中,肠电解质溶液组成为0.06~ 0.12 mol/L NaCl,胰蛋白酶和肠电解质溶液配比按质量体积比mg/mL为1:(10~16)。
7.如权利要求6所述的海参活性肽,其特征在于,步骤(2)中,肠电解质溶液组成为0.085 mol/L NaCl,胰蛋白酶和肠电解质溶液配比按质量体积比mg/mL为1:14。
8.如权利要求1所述的海参活性肽,其特征在于,步骤(2)中,模拟肠液用NaHCO3调节pH值至7~7.5。
9.如权利要求1所述的海参活性肽,其特征在于,步骤(3)中,加入乙醇溶液的量,按质量体积比g/mL为1:(20-45),提取温度为30 ~ 50 ℃。
10.如权利要求9所述的海参活性肽,其特征在于,步骤(3)中,加入乙醇溶液的量,按质量体积比g/mL为1:35,提取温度为40 ℃。
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