[发明专利]从生物材料中分离纯化核酸固体的方法

权利要求书

1.从生物材料中分离纯化核酸固体的方法,其特征是包括如下步骤：

(1)按体积比为1：(1～11)的比例，将含有裸露核酸的液体与起沉淀作用的3.64M-5M的碱金属盐水溶液混合；在室温下，离心，将上清液倒入新离心管中；

(2)用下述两种方式之一进行：

方式二：

按体积比为(1～4.4)：1的比例，向步骤(1)获得的装有上清液的新离心管中加入异丙醇，混匀；在室温下，静置1-30min，再加入相当于所述上清液体积(0.0714-0.1348)倍的蒸馏水，混匀，离心，有白色沉淀生成，弃去白色沉淀以外的其它；洗涤，得到DNA固体，或DNA与RNA的混合固体，保存；

所述洗涤是用体积百分浓度为70％-90％的乙醇水溶液洗涤，在室温下，2000～16000g离心10～60s，倒掉洗涤液；再用无水乙醇洗涤，晾干；

方式三：

1)按体积比为(1.5～1.76)：1的比例，向步骤(1)获得的装有上清液的新离心管中加入异丙醇，混匀，在室温下，静置1-30min，离心，有白色沉淀生成，将除白色沉淀以外的、命名为保留液的液体倒入另一个新离心管中；洗涤白色沉淀，得到RNA固体，或RNA与DNA的混合固体，保存；

2)向装有保留液的新离心管中加入蒸馏水，混匀；在室温下，离心1～30min，有白色沉淀生成；弃去白色沉淀以外的其它，洗涤；得到DNA固体，保存；所述上清液与蒸馏水的体积比为1：(0.125-0.1705)；

所述洗涤是用体积百分浓度为70％-90％的乙醇水溶液洗涤，在室温下，2000～16000g离心10～60s，倒掉洗涤液；再用无水乙醇洗涤，晾干；

所述含有裸露核酸的液体用下述方法制备：

按比例，将16.27-162.8mg的生物材料与1ml匀浆解离剂进行匀浆，得到含有裸露核酸的液体；

所述匀浆解离剂是按200ml：10-50ml：0-10g的比例，由甲酰胺、浓度为5M-14M的碱金属盐水溶液和去除细胞次生代谢物的化合物组成；

所述去除细胞次生代谢物的化合物为酪蛋白，聚乙烯吡咯烷酮40和十六烷基三甲基溴化铵中至少一种。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述生物材料为动物器官、动物组织、动物细胞、植物器官、植物组织、植物细胞、真菌或细菌。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述匀浆解离剂按200ml：10-50ml：2-5g的比例，由甲酰胺、浓度为5M-14M的碱金属盐水溶液和去除细胞次生代谢物的化合物组成；所述去除细胞次生代谢物的化合物为酪蛋白，聚乙烯吡咯烷酮40和十六烷基三甲基溴化铵中至少一种。

4.根据权利要求1或3所述的方法，其特征是所述碱金属盐为氯化锂或氯化钠。