[发明专利]IgM抗体检测试剂盒及其检测卡和检测卡的制备方法

说明书

本发明公开了一种IgM抗体检测试剂盒及其检测卡和检测卡的制备方法，其中IgM抗体检测卡包括：底衬、包被膜、样品垫和吸水纸；样品垫靠近包被膜的一端喷涂有微球线，微球线为由稀土纳米探针标记的抗人IgM抗体和稀土纳米探针标记的兔IgG抗体；包被膜上依次设置有检测线和质控线，检测线靠近样品垫；检测线包被有新型冠状病毒重组抗原、甲型流感病毒重组抗原和乙型流感病毒重组抗原，质控线包被有羊抗兔抗体。本发明的纳米探针为稀土氟化物纳米材料具有背景低，发光寿命长，荧光信号强，信噪比高等优势，标记产物稳定，具有灵敏度高、准确度高、检测快速简便等特点，可对早期新冠疑似患者进行筛查检测，能够快速特异地帮助临床确诊。

技术领域

本发明涉及IgM抗体检测试剂盒及其检测卡和检测卡的制备方法，特别涉及新型冠状/甲型流感/乙型流感病毒IgM抗体检测试剂盒及其检测卡和检测卡的制备方法。

背景技术

新型冠状病毒基于目前的流行病学调查，潜伏期一般为3-7天，最长不超过14天。感染者以发热、乏力、干咳为主要表现。鼻塞、流涕等上呼吸道症状少见。约半数患者多在一周后出现呼吸困难，严重者快速进展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能障碍。值得注意的是重症、危重症患者病程中可为中低热，甚至无明显发热。

新型冠状病毒也称严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒-2，已明确为β属冠状病毒，是感染人类冠状病毒家族中第7个成员，与2003年的SARS冠状病毒一样，由RNA核酸和蛋白等组成，RNA很容易降解，蛋白衣壳将RNA包裹在其中，加上一层由脂质和糖蛋白组成的包膜外衣，从而使其RNA得到保护，病毒RNA编码四种主要结构蛋白，包括刺突糖蛋白(S，SpikeProtein)、小包膜糖蛋白(E，Envelope Protein)和膜糖蛋白(M，Membrane Protein)，及核衣壳(N)蛋白，其中S蛋白对于病毒识别与入侵有着关键的作用。病毒通过S-蛋白与人ACE2互作的分子机制，来感染人的呼吸道上皮细胞，病毒进入人体后，主要通过激活免疫系统，通过细胞因子、炎症因子等导致肺损伤。并且利用宿主细胞进行复制增殖。因此可以通过采集人的特定部位细胞样本，检测其中是否含有病毒RNA核酸，来确认机体是否受到感染。

核酸检测是目前新型冠状病毒感染确诊的“金标准”，然而病毒核酸检测存在检测时间和周期长、环境要求高、技术力量要求高、硬件设备要求高、价格昂贵等一系列问题，只能在省/市级疾控中心和较大规模的三甲医院开展，不利于肺炎患者的快速诊断和筛查，不利于疫情的防控。

《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案》要求，新型冠状病毒肺炎需与流感病毒、腺病毒等其他已知性病毒肺炎感染相鉴别。病毒基因测序或PCR技术进行病毒核酸检测作为鉴别的主要方法。然而病毒核酸检测存在检测时间长，对环境、技术、设备的要求较高，面对多种病毒相互干扰导致“假阳性”“假阴性”等问题。目前有公司推出新型冠状病毒抗体快速检测试剂，但这些试剂只能诊断新型冠状病毒的感染，无法做到对甲型流感病毒感染和乙型流感病毒感染同时确诊。

本发明研制出一种基于稀土纳米探针的新型冠状病毒、甲型和乙型流感病毒感染的IgM抗体快速三联合检测试剂盒。通过一次检测，就能在早期准确地鉴别是新冠病毒感染还是甲型或者乙型流感病毒感染。为排查疑似患者、鉴别新冠病毒和流感病毒感染，特别是对同时感染新冠肺炎和流感的患者提供现场快速高通量检测手段。IgM抗体检测试剂，可与核酸联合检测，有助于提高新冠病毒检出率、避免“假阴性”、提升确诊率、降低对实验室的要求。

新型冠状/甲型流感/乙型流感病毒IgM抗体是在病毒感染过程中人体免疫系统首先出现的抗体，在感染后较早出现，在急性期或者恢复期达到高峰。可对早期疑似患者进行筛查检测，能够快速特异地帮助临床筛查并区分。