[发明专利]一种与奶牛热应激相关的circRNA标志物及其应用

权利要求书

1.一种与奶牛热应激相关的circRNA标志物，其特征在于：

所述的circRNA标志物为circSCD，其序列如SEQ ID NO：1所示。

2.一种如权利要求1所述的circRNA标志物的检测引物，其特征在于所述检测引物为：

CircSCD的上游引物序列为：5′-CCTGGCTGGTGAATAGTGCT-3′；

CircSCD的下游引物序列为：5′-ACCAGGTTTGTAGTACCCGC-3′。

3.一种如权利要求1所述的circRNA标志物的靶标miRNA，其特征在于：

所述的miRNA为bta-miR-183，其序列如SEQ ID NO：2所示。

4.一种如权利要求3所述的靶标miRNA的检测引物，其特征在于：

上游引物F：5′-GGTATGGCACTGGTAGA-3′；

下游引物R：5′-GTGCAGGGTCCGAGGT-3′。

5.权利要求1所述的circRNA标志物或权利要求2所述的检测引物的应用，其特征在于：所述的应用为下列的任一种：

权利要求1所述的circRNA标志物或权利要求2所述的检测引物在奶牛热应激遗传标记及改善奶牛热应激条件下奶牛泌乳过程中的应用；

权利要求1所述的circRNA标志物或权利要求2所述的检测引物在制备奶牛热应激遗传标记及改善奶牛热应激条件下泌乳过程的试剂盒中的应用。

6.权利要求3所述的靶标miRNA或权利要求4所述的检测引物的应用，其特征在于：所述的应用为下列的任一种：

权利要求3所述的靶标miRNA或权利要求4所述的检测引物在奶牛热应激遗传标记及改善奶牛热应激条件下奶牛泌乳过程中的应用；

权利要求3所述的靶标miRNA或权利要求4所述的检测引物在制备奶牛热应激遗传标记及改善奶牛热应激条件下泌乳过程的试剂盒中的应用。

7.一种检测权利要求1所述的circRNA标志物的试剂盒，其特征在于含有权利要求2所述的circRNA标志物的检测引物。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于：

所述的试剂盒还含有针对权利要求1所述circSCD的反转录试剂、内参引物、荧光定量PCR反应液；

所述的内参引物包括GAPDH内参基因的上游引物和下游引物，上游引物序列为SEQ IDNO：4，下游引物序列为SEQ ID NO：5。

9.权利要求7或8所述的试剂盒在奶牛乳腺组织中circSCD的定量检测中的应用。

10.一种检测权利要求1所述的circRNA标志物的方法，其特征在于包括如下步骤：

1)提取奶牛乳腺组织总RNA；

2)通过反转录随机引物在反转录酶的作用下进行circSCD反转录成cDNA；

3)在荧光实时定量PCR仪上将步骤2)获得的cDNA和内参基因进行扩增检测；

4)通过溶解曲线分析，2^-ΔΔCt法进行相对定量。